[发明专利]Uu-DnaJ蛋白的应用以及抗Uu感染的疫苗

说明书

本发明涉及生物技术领域，公开了Uu‑DnaJ蛋白的应用以及抗Uu感染的疫苗。本发明提供了Uu‑DnaJ蛋白和其T/B细胞优势表位氨基酸片段在制备Uu免疫原或抗Uu感染的疫苗中的新应用，相关实验结果显示，Uu‑DnaJ蛋白能被感染Uu的小鼠血清识别，免疫后能够产生特异性抗体反应，抗体效价高达1:640000；同时Uu‑DnaJ免疫小鼠后刺激脾淋巴细胞增殖增加，产生诱导从IgG1过渡到保护性IgG2a亚型抗体反应和Th1型细胞免疫反应，由此减少小鼠子宫颈Uu定植量、炎症反应和病变，充分表现出免疫保护作用，种种结果证明Uu‑DnaJ蛋白具备开发抗Uu感染的疫苗的潜力。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，特别涉及Uu-DnaJ蛋白的应用以及抗Uu感染的疫苗。

背景技术

解脲脲原体(Ureaplasma urealyticum，Uu)是Shepard于1954年首次从非淋菌性尿道炎患者尿道中分离出的致病菌，因其所形成的菌落微小亦被称为“T株”支原体。Uu与人类泌尿生殖道感染密切相关，也是迄今为止发现的最小的能在无生命培养基中生长的具有自我复制能力的原核型微生物。尽管它是从革兰氏阳性祖先进化而来，但无细胞壁，属于柔膜体纲的支原体目。在含尿素的液体支原体培养基中生长时，Uu可分解尿素产氨改变环境pH值进而使指示剂变色。研究表明，Uu是一种在成人泌尿生殖道中定植的低毒力共生菌并可通过性接触传播，常存在于性活跃女性的下泌尿生殖道中，在世界范围内其发病率在40％至80％之间。Uu首先通过黏附在呼吸道或泌尿生殖道上皮细胞表面并定居，并产生许多毒性物质，如脲酶、IgA蛋白酶和磷脂酶等，这无疑会增加一些生殖道疾病的风险，如阴道病、尿道炎、宫颈炎、盆腔炎等。

虽然作为人类无症状携带的常见支原体，Uu对人类的致病作用仍然存在一定的争议，但随着人们对Uu生物群及血清型认识的不断深入，有研究者推测Uu的致病性可能与其不同生物群及血清型存在相关性。脲原体由两种生物类型和14种血清型组成，生物1群(或Parvo)为微小脲原体(U.parvum，UP)，包括基因1型(血清1型)、基因3型(血清3及14型)及基因6型(血清6型)；而生物2群(或T960)为解脲脲原体(U.urealyticum，Uu，本发明以下Uu均表示为此解脲脲原体)，包括基因4型(血清4、7、10、11、12及13型)和基因8型(血清2、5、8和9型)，多为血清型混合感染为主。Uu主要依据表面抗原即多带抗原(MμLtiple-bandedantigen，MBA)进行分型，各血清型MBA长度并不一致，故MBA也是Uu不同生物群、血清型感染引起不同疾病的因素之一。有研究报道Uu生物1群是下生殖道的正常携带菌群,而Uu生物2群则与下生殖道的致病性感染有关。虽然大多数Uu感染者并无明显临床症状，但这些感染会增加胎膜早破、自发性早产、流产和死产等不良妊娠结局的风险。女性生殖道短而直易受Uu感染，且感染早期症状不明显易被忽视，最后会导致慢性、持续性及交叉感染。而妇女妊娠期间，其孕妇身体的整体免疫水平会降低，若免疫平衡出现紊乱则易引起Uu上行性感染，并通过胎盘引起宫内感染，导致胎膜早破、自发性早产、流产等不良妊娠结局。妊娠期孕妇若无明显感染症状，临床不主张采取干预措施。有研究指出在免疫功能低下的成人中，Uu被发现是侵袭性感染的罪魁祸首，且Uu可能会进一步导致早产儿和足月儿的肺炎、脓毒症和脑膜炎。其中，胎龄越低，患病风险则越高。新生儿脑膜炎和神经炎可能会引起严重的脑损伤，并对患者健康产生长期的不良影响。Uu定植还与脑脓肿、前列腺炎、类风湿性关节炎、人工关节感染和肺移植后的高氮血症等有关。尽管Uu感染者可以用抗生素治疗，但随着多重耐药菌株的出现和传播，给一、二线抗菌药的治疗带来极大的挑战，且临床上Uu感染者存在无症状、慢性、持续性、反复性感染。针对它们所引起的生殖道感染难以根治的特性及血清型较多，致病物质难以明确等情况，预防相关疾病的发生比单纯用药治疗更加有效和经济。但是，国内外至今尚未有脲原体相关疫苗被批准应用于临床治疗。因此，亟待研发一种安全、高效和经济的广谱疫苗用于预防脲原体感染。