[发明专利]一种制备迷迭香熊果酸的方法

权利要求书

1.一种制备迷迭香熊果酸的方法，其特征在于具体的工艺步骤如下：

(1)制备熊果酸滤液

先将体积百分浓度为40～50％，pH为2～4的乙醇水溶液泵入溶解罐中，再加入质量百分含量为10～30％熊果酸的迷迭香脂溶性抗氧化剂提取物，所述质量百分含量10～30％熊果酸的迷迭香脂溶性抗氧化剂提取物质量与体积百分浓度为40～50％乙醇的体积比为1kg∶20～30L。将迷迭香脂溶性抗氧化剂提取物加入完毕后，继续搅拌溶液15～30min后进行第一次过滤，直至无滤液滤出时止。分别收集第一次滤过液和第一次滤渣。对收集的第一次滤过液，用于制备鼠尾草酸质量百分含量为30～45％的脂溶性抗氧化剂；对收集的第一次滤渣，用体积百分浓度为90～95％乙醇进行溶解，滤渣质量与体积百分浓度为90～95％乙醇的体积比为1kg∶20～30L，在搅拌溶解30～45min后进行第二次过滤，直至无滤液滤出时止。分别收集第二次滤过液和第二次滤渣。对收集的第二次滤过液，即制备出熊果酸滤液，用于下步进行膜过滤分离；对收集的第二次滤渣，回收乙醇后用于制备复合肥料；

(2)制备膜过滤分离液

第(1)步完成后，将第(1)步制得的熊果酸滤液泵入截留分子量为30～50KDa耐有机溶剂膜分离机中，在表压为0.6～1.6MPa的条件下进行第一次膜分离，直至该膜分离截留液与滤过液的体积为1L∶5～8L时停止膜分离。分别收集第一次膜分离滤过液和第一次膜分离截留液。对收集的第一次膜分离滤过液，与后续膜分离获得的滤过液合并，用于下步制备熊果酸分离液；对收集的第一次膜分离截留液用体积百分浓度为90～95％乙醇进行稀释，第一次膜分离截留液与加入的体积百分浓度为90～95％乙醇溶液的体积比为1L∶5～8L。稀释完成后进行第二次膜分离，第二次膜分离表压为0.6～1.6MPa，直至其膜分离截留液与滤过液的体积比为1L∶5～8L时停止膜分离。分别收集第二次膜分离滤过液、第二次膜分离截留液和截留分子量为30～50KDa耐有机溶剂的膜，对收集的第二次膜分离截留液，用于制备高纯度叶绿素和醇溶性多糖；对收集的第二次膜分离滤过液，与收集的第一次膜分离滤过液进行合并，即制备出膜过滤分离液，用于下步制备熊果酸纯化液；对收集的30～50KDa耐有机溶剂的膜，用0.5～1％碱液清洗后再用纯净水清洗至pH值为5～7，再加入体积百分浓度为0.1～0.5％的甲醛溶液密闭保存；

(3)制备熊果酸纯化液

取粒径为35～75μm的MCI GEL CHP 20树脂，用4～8倍树脂体(BV)的无水乙醇浸泡4～8小时，去除上层漂浮的树脂颗粒后，后用4～8倍树脂体积(BV)pH＝3～5的体积百分浓度为40～60％乙醇水溶液平衡1～4小时，备用；

第(2)步完成后，将第(2)步制备的膜分离滤过液泵入装有粒径为35～75μm的活化MCI树脂的树脂柱中，控制泵入液的流速2～5倍树脂体积(BV)/h，MCI树脂体积与该膜分离滤过液体积比1L∶10～20L。待膜分离滤过液泵入完成后，以1～5BV/h的流速泵入体积百分浓度为70～80％的乙醇水溶液洗脱，分别收集第1～4BV、第5～8BV及第9～12BV的洗脱液。对收集的第1～4BV及第9～12BV洗脱液进行合并，用于回收乙醇；对收集的第5～8BV的洗脱液，即为熊果酸纯化液，用于下部制备熊果酸粉末。洗脱出熊果酸的MCI树脂柱可再次用于制备下批次熊果酸纯化液；

(4)制备熊果酸粉末

第(3)步完成后，将第(3)步获得的熊果酸纯化液，泵入旋转蒸发仪中，在温度为60～70℃、相对真空度为-0.06MPa～-0.09MPa下减压蒸馏乙醇，待冷凝器中无冷凝液体流出时，停止蒸馏，分别收集蒸馏冷凝液乙醇和浓缩液。对于收集的浓缩液，转入结晶罐中，在温度为20～40℃区间进行结晶12～24小时，然后过滤，分别收集滤液和滤渣，对收集的滤液，泵至下批次(3)制备熊果酸纯化液步骤中；对收集的滤渣，送入真空干燥机中，进行进一步干燥，在温度50～60℃，相对真空度为-0.06～-0.09MPa的条件下干燥5～8h，即制备出熊果酸粉末。该迷迭香脂溶性抗氧化剂中熊果酸质量百分含量为95～98％，其总收得率为迷迭香脂溶性抗氧化剂粗品质量的25～35％；

(5)制备叶绿素和醇溶性多糖洗脱液

取粒径为75～150μm的MCI GEL CHP 20树脂，用4～8倍树脂体(BV)的无水乙醇浸泡4～8小时，去除上层漂浮的树脂颗粒后，后用4～8倍树脂体积(BV)pH＝3～5的体积百分浓度为40～60％乙醇水溶液平衡1～4小时，备用；

第(2)步完成后，将第(2)步制备的第二次膜分离截留液泵入装有粒径为75～150μm的活化MCI树脂的树脂柱中，控制泵入液的流速2～5倍树脂体积(BV)/h，MCI树脂体积与该第二次膜分离截留液体积比1L∶10～20L。待膜分离截留液泵入完成后，以1～5BV/h的流速泵入体积百分浓度为85～95％的乙醇水溶液洗脱，分别收集第1～4BV、第6～8BV及9～11BV的洗脱液。对收集的第1～4BV的洗脱液，含醇溶性多糖，即为醇溶性多糖洗脱液，用于下步制备醇溶性多糖粉末；对收集的第6～8BV的洗脱液，含叶绿素，用于下步制备叶绿素粉末；对收集的第9～11BV的洗脱液，用于回收乙醇；

(6)制备叶绿素粉末

第(5)步完成后，将第(5)步获得的含有叶绿素的洗脱液，泵入旋转蒸发仪中，在温度为60～70℃、相对真空度为-0.06MPa～-0.09MPa下减压蒸馏乙醇，待冷凝器中无冷凝液体流出时，停止蒸馏，分别收集蒸馏冷凝液和蒸馏浓缩液。对于收集的蒸馏浓缩液，转入真空干燥机中，在温度50～60℃，相对真空度为-0.06～-0.09MPa的条件下干燥5～8h，即制备出叶绿素粉末。其叶绿素质量百分含量为90～98％，其总收得率为迷迭香脂溶性抗氧化剂粗品质量的12～20％；

(7)制备醇溶性多糖粉末

第(6)步完成后，将第(5)步获得的含有醇溶性多糖的洗脱液，首先将洗脱液在转速为1500～4000r/min，离心时间为10～20min。离心完成后，分别收集离心沉淀和离心清液。对收集的离心清液，用于回收乙醇；对收集的离心沉淀，转入真空干燥机中，在50～60℃，相对真空度为-0.06～-0.09MPa的条件下干燥5～8h，即制备出干燥醇溶性多糖。接着，将获得的干燥醇溶性多糖用粉碎机进行粉碎并过40～200目的分样筛，分别收集过40～200目的分样筛的粉末和未过40～200目的分样筛的干燥醇溶性多糖，对过40～200目分样筛的粉末，即制备出醇溶性多糖粉末。对收集的未过40～200目的分样筛的干燥醇溶性多糖，返回粉碎机中再次粉碎，直至全过40～200目分样筛时停止。制备的醇溶性多糖粉末中，醇溶性多糖质量百分含量为85～91％，其总收得率为迷迭香脂溶性抗氧化剂粗品质量的25～30％。