[发明专利]一种扩张床逆流色谱分离纯化肝素的方法有效
申请号: | 202110675615.4 | 申请日: | 2021-06-18 |
公开(公告)号: | CN113402635B | 公开(公告)日: | 2022-07-01 |
发明(设计)人: | 刘杨;陈杰;赵永杰 | 申请(专利权)人: | 汕头大学 |
主分类号: | C08B37/10 | 分类号: | C08B37/10;B01D15/20;B01D15/26 |
代理公司: | 北京东方盛凡知识产权代理事务所(普通合伙) 11562 | 代理人: | 贾耀淇 |
地址: | 515063 广*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 扩张 逆流 色谱 分离 纯化 肝素 方法 | ||
1.一种扩张床逆流色谱分离纯化肝素的方法,其特征在于,以阴离子交换树脂作为固体吸附介质,将其加入扩张床逆流色谱分离柱中,肝素溶液上样至扩张床逆流色谱进行吸附、洗脱、醇沉、离心、洗涤得纯化后的肝素;
所述阴离子交换树脂为D204;
所述扩张床逆流色谱分离纯化肝素过程中,上样和洗脱流速方向均为由上向下;
所述阴离子交换树脂的加入量和扩张床逆流色谱分离柱的有效柱体积的比例为(2.0-5.0)g:30mL;肝素上样量和扩张床逆流色谱分离柱的有效柱体积的比例为(50-200)mg:30mL;在所述上样中转速与流速为:在转速200rpm下,上样流速为1-3mL/min,或者在转速300rpm下,上样流速为1-4mL/min,或者在转速400rpm下,上样流速为3-8mL/min,或者在转速500rpm下,上样流速为10mL/min;
吸附过程中的流动相为pH值为8.5的Tris-HCl缓冲液;
所述洗脱具体包括:使用2-4mol/L的NaCl作为洗脱液,洗脱流速为1-5mL/min;
所述上样为循环上样;循环上样次数为4次。
2.一种根据权利要求1所述的扩张床逆流色谱分离纯化肝素的方法所得到的肝素,所述上样是在转速200rpm或300rpm下,上样流速为2mL/min。
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