[发明专利]能表达冰冻蛋白的黑曲霉发酵菌种在审
申请号: | 202110675825.3 | 申请日: | 2021-06-18 |
公开(公告)号: | CN113444159A | 公开(公告)日: | 2021-09-28 |
发明(设计)人: | 范岩;牟洋 | 申请(专利权)人: | 南京纽田科技有限公司 |
主分类号: | C07K14/39 | 分类号: | C07K14/39;C12N15/31;C12N15/80;C12N1/15;C12R1/685 |
代理公司: | 北京科家知识产权代理事务所(普通合伙) 11427 | 代理人: | 周雷 |
地址: | 210000 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 表达 冰冻 蛋白 曲霉 发酵 菌种 | ||
1.冰冻蛋白,其特征在于,所述冰冻蛋白来源于白冬孢酵母或来源于与白冬孢酵母的蛋白氨基酸序列同源性不低于99%的菌种,所述冰冻蛋白的编码基因序列如SEQ ID NO.1。
2.根据权利要求1所述的冰冻蛋白,其特征在于,所述的冰冻蛋白的编码基因序列为C端截短的来源于白冬孢酵母的冰冻蛋白的编码基因。
3.根据权利要求2所述的冰冻蛋白,其特征在于,所述的冰冻蛋白的氨基酸序列如SEQID NO.3所示。
4.编码权利要求2或3所述的冰冻蛋白的表达载体,其特征在于,由一个合成的多聚核苷酸组成。
5.根据权利要求4所述的编码冰冻蛋白的表达载体,其特征在于,所述表达载体由包含由一个启动子序列SEQ ID NO.4,一个合成的截短的编码冰冻蛋白的核苷酸序列SEQ IDNO.2和一个终止子序列SEQ ID NO.5组成。
6.根据权利要求5所述的编码冰冻蛋白的表达载体,其特征在于,所述表达载体还包括能够知道冰冻蛋白分泌的信号序列,所述信号序列位于编码冰冻蛋白的核苷酸序列的上游。
7.重组的微生物宿主细胞,其特征在于,包含如权利要求5所述的表达载体。
8.根据权利要求7所述的重组的微生物宿主细胞,其特征在于,所述表达冰冻蛋白的基因被随机整合到重组宿主细胞的染色体上。
9.根据权利要求8所述的重组的微生物宿主细胞,其特征在于,所述微生物宿主细胞为黑曲霉。
10.生产冰冻蛋白的方法,其特征在于,方法步骤如下:培养权利要求7-9任一项所述的重组的微生物宿主细胞用于表达冰冻蛋白,然后在培养的重组的微生物宿主细胞的上清液中离心过滤得到冰冻蛋白。
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