[发明专利]一种荧光免疫检测毛发痕量毒品的试剂盒及其图像检测方法与系统在审
申请号: | 202110679178.3 | 申请日: | 2018-07-30 |
公开(公告)号: | CN113341135A | 公开(公告)日: | 2021-09-03 |
发明(设计)人: | 欧阳云;方芳;郑水娣 | 申请(专利权)人: | 杭州莱和生物技术有限公司 |
主分类号: | G01N33/558 | 分类号: | G01N33/558;G01N33/58;G01N33/533;G01N33/53;G01N1/28 |
代理公司: | 宁波理文知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 33244 | 代理人: | 李高峰;孟湘明 |
地址: | 310000 浙江省杭州市滨江区长*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 荧光 免疫 检测 毛发 痕量 毒品 试剂盒 及其 图像 方法 系统 | ||
1.一种荧光免疫检测毛发痕量毒品的试剂盒,其特征在于,包括样品清洗液,裂解液,荧光免疫层析试纸条;
所述清洗液用于将毛发样品表面污物清除,所述裂解液用于将毒品小分子从毛发中溶出;
所述荧光免疫层析试纸条包含PVC衬板、硝酸纤维膜、样品垫和吸收垫,所述样品垫、硝酸纤维膜和吸收垫依次交错固定于PVC衬板之上;
所述样品垫上有毒品抗体-量子点纳米颗粒复合物以及兔IgG-量子点纳米颗粒复合物;
所述硝酸纤维膜上设有检测线和质控线,检测线包被有毒品抗原-牛血清白蛋白复合物,质控线包被有羊抗兔抗体。
2.根据权利要求1的所述试剂盒,其特征在于,清洗液、裂解液和毛发的质量比为(15-28):(70-73):1,所述清洗液包含表面活性剂,所述裂解液包含角蛋白酶和缓冲溶液。
3.根据权利要求1的所述试剂盒,其特征在于,所述表面活性剂为非离子表面活性剂。
4.根据权利要求1的所述试剂盒,其特征在于,非离子表面活性剂为聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、Triton X 100、Triton X 114、Triton X 405、Tween 20、Tween 60、Tween 80中的至少一种,所述缓冲溶剂为TRIS(无水四硼酸钠),EDTA缓冲溶液或者缓冲溶剂为TRIS(无水四硼酸钠),EDTA缓冲溶液和碳酸氢钠。
5.根据权利要求1的所述试剂盒,其特征在于,所述裂解液中角蛋白酶的含量为14000-72000IU/ML。
6.根据权利要求1的所述试剂盒,其特征在于,所述量子点纳米颗粒的荧光发射波长范围为600-620nm,所述量子点纳米颗粒选自ZnS、CdS、HgS、MgS、CdSe、ZnSe、ZnCdSe中的一种或多种。
7.一种利用如权利要求1-6中任一项试剂盒以实现荧光免疫检测毛发痕量毒品的图像检测方法,其特征在于,包括如下步骤:
S1配制含有不同浓度的毒品的裂解液标准品,将其滴入试条的滴入口,待试条T线和C线颜色目视稳定后,使用共聚焦荧光检测系统对试条T线和C线进行荧光进行成像,使用共聚焦荧光检测系统对试条T线和C线进行荧光进行成像,获得多个对应不同毒品浓度的第一图像;
S2将所述多个对应不同毒品浓度的第一图像作为人工智能模型输入端,以相应的浓度作为输出端,建立痕量毒品智能识别模型;
S3获取待测毛发样品,并将其处理成平均长度在5-10mm的细碎;
S4使用上述的试剂盒中的清洗液将步骤S3中处理好的毛发细碎进行清洗预定的时间t1;并将清洗完毕的所述毛发细碎经冲洗和烘干后浸泡于裂解液中预设的时间t2;
S5将浸泡后的裂解液滴入试条的滴入口,待试条T线和C线颜色目视稳定后,使用共聚焦荧光检测系统对试条T线和C线进行荧光进行成像,获得第二图像;将第二图像代入步骤S2建立的痕量毒品智能识别模型中得到检测结果。
8.如权利要求7所述的检测方法,其特征在于,步骤S2中所述人工智能模型包括卷积神经网络(CNN),深度神经网络(DNN),SVM向量机,生成对抗网络(GAN)中任一种,对于第一图像分为训练集和验证集,两者比例为8:1-1:1;
步骤S4中预定的时间t1为10-30s,预设的时间t2为30s-5min,所述清洗包括将所述毛发细碎放入带有过滤网的第一样品容器中,利用清洗液清洗,并通过过滤网将清洗液滗出;所述冲洗用的冲洗液包括去离子水,冲洗次数为1-3次;
步骤S4中所述浸泡于裂解液中,包括将样品容器和/或过滤网上烘干的样品,全部倒入第二样品容器中,与裂解液混合浸泡。
步骤S1和S5中第一和第二图像是通过T线和C线的成像部分进行融合而获得,形成内部具有两条平行色线的矩形图像作为检测图像。
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