[发明专利]巨噬细胞专属嵌合抗原受体、表达该受体的可控极化单核/巨噬细胞及其制备方法和应用有效
| 申请号： | 202110682523.9 | 申请日： | 2021-06-18 |
| 公开（公告）号： | CN113402616B | 公开（公告）日： | 2022-09-23 |
| 发明（设计）人： | 张进;雷安华;田琳 | 申请（专利权）人： | 浙江大学 |
| 主分类号： | C07K19/00 | 分类号： | C07K19/00;C12N5/10;C12N15/867;A61K39/00;A61P35/00 |
| 代理公司： | 北京超凡宏宇专利代理事务所(特殊普通合伙) 11463 | 代理人： | 陈露 |
| 地址： | 310000 浙江*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 巨噬细胞 专属 嵌合 抗原 受体 表达 可控 极化 单核 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种嵌合抗原受体，其特征在于，包括依次连接的胞外抗原结合域、跨膜结构域和胞内激活结构域；
所述胞外抗原结合域包括信号肽和/或靶向EGFRvIII的scFv；
跨膜结构域包括CD8α；
所述胞内激活结构域选自TIR、CD3ZETA或GM-CSFRα/β中的一种；
所述信号肽由SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列表达；
所述scFv由SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列表达；
所述CD8α由SEQ ID NO.3所示的核苷酸序列表达；
所述TIR由SEQ ID NO.4所示的核苷酸序列表达；
所述CD3ZETA由SEQ ID NO.5所示的核苷酸序列表达；
所述GM-CSFα/β由SEQ ID NO.6所示的核苷酸序列表达。
2.一种非疾病诊断和治疗目的的巨噬细胞的极化方法，其特征在于，将权利要求1所述的嵌合抗原受体在巨噬细胞中表达。
3.一种巨噬细胞，其特征在于，包括权利要求1所述的嵌合抗原受体。
4.权利要求3所述的巨噬细胞的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：构建含有所述嵌合抗原受体的基因表达序列的慢病毒表达体系，利用慢病毒表达体系将嵌合抗原受体的基因表达序列整合到多能干细胞中，经诱导分化后制备得到巨噬细胞。
5.权利要求4所述的巨噬细胞的制备方法，其特征在于，所述多能干细胞先诱导分化为单核细胞，再分化得到巨噬细胞。
6.一种能够分化得到权利要求3所述巨噬细胞的多能干细胞，其特征在于，所述多能干细胞含有编码所述嵌合抗原受体的基因。
7.一种能够分化得到权利要求3所述巨噬细胞的单核细胞，其特征在于，所述单核细胞含有编码所述嵌合抗原受体的基因；
所述单核细胞由多能干细胞分化得到。
8.权利要求3所述的巨噬细胞、权利要求6所述的多能干细胞或权利要求7所述的单核细胞在制备用于治疗神经胶质瘤的产品中的应用。
9.一种用于治疗神经胶质瘤的产品，其特征在于，所述产品包括权利要求3所述的巨噬细胞。
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