[发明专利]PDX建模佐剂及其应用

说明书

本发明涉及一种PDX建模佐剂及其应用，其包括转化生长因子β、表皮细胞生长因子、碱性成纤维细胞生长因子、血管内皮生长因子、胰岛素、氢化可的松、Y‑27632、胎牛血清和溶剂。本发明的PDX建模佐剂为提高PDX模型接种成功率，加速肿瘤生长以适应实验需求，组合多种促血管生成因子和营养物质，能够解决PDX模型早期血管网建立困难的问题，并且结合局部抗炎药物氢化可的松、促干细胞生长的化合物ROCK抑制剂Y‑27632，有助于保证肿瘤干细胞的存活，降低肿瘤细胞凋亡，从而改善了PDX模型建模成功率，加快了肿瘤异体移植模型生长速度。

技术领域

本发明涉及抗肿瘤药物研发领域，特别是涉及一种PDX建模佐剂及其应用。

背景技术

癌症一直以来都是危害人类健康的重大困扰，许多癌症早期患者无明显症状，直到晚期或者转移时才能被发现，治疗结果往往令人失望。尽管肿瘤的基础研究、临床研究及转化医学取得了不少的成绩，但新治疗方法并未给患者带来理想的治疗方案和预后效果。为了更深入地研究肿瘤发展以及寻找更好的药物治疗方法，研究肿瘤的模型特别是动物模型将具有非常重要的价值。

传统的异种移植肿瘤模型为人源肿瘤细胞系异种移植(cell derivedxenograft,CDX)，即将人类肿瘤细胞在体外筛选，经过体外传代培养，建立稳定细胞株，然后接种至免疫缺陷小鼠皮下、肾包膜下或原位移植而建立的模型，这种模型的建立以及在肿瘤研究中的应用已有漫长历史。早在20世纪90年代早期，美国国立癌症研究所(NationalCancer Institute,NCI)就依据来源于9种不同类型肿瘤(脑、结肠癌、白血病、肺、黑素瘤、卵巢癌、肾癌、乳腺癌和前列腺癌)的60位癌症患者肿瘤细胞系，引入了一种“disease-oriented”的药物筛选策略，简单来说，就是先用人肿瘤细胞系进行高通量体外药物筛选，再用CDX模型进行体内验证。但是，研究者逐渐发现人源肿瘤细胞系经长期体外培养后，其肿瘤细胞生物学行为及基因谱表达水平、肿瘤异质性都与原始肿瘤组织存在较大的差异，从而在预测临床药效方面不甚理想。有研究表明，经此模型鉴定筛选的药物仅约1/3在二期临床试验中验证有效。其原因在于，连续传代的肿瘤细胞株适应了外界培养皿的环境，缺乏肿瘤微环境，这些细胞株种植到免疫缺陷小鼠后形成的肿瘤与小鼠具有同质性，丢失了原代肿瘤的特性，因此不能客观地反应原代肿瘤的情况。

而人源肿瘤异体移植模型(PDX模型)是目前在抗肿瘤药物研发领域广泛应用的一种替身模型。该模型是将癌症患者自身的肿瘤组织移植到免疫缺陷动物上，使其在继续生长、传代，从而生产大量携带该患者肿瘤的荷瘤动物。由于PDX模型保持了患者肿瘤的病理、分子特征及异质性，其对抗肿瘤药物的敏感性与供体患者肿瘤相同。相较于传统的细胞系移植模型(cell-derived xenograft,CDX)，PDX模型未经过体外培养，较好地保持了原发肿瘤的遗传特性和异质性，实验结果临床预见性更好，可以说是现阶段最优秀的肿瘤动物模型。PDX模型可以进行传代扩增，研究表明传代的肿瘤组织能够和初始肿瘤组织保持高度的一致性，为药物筛查和病人患病机制研究提供了很好的条件。因此，检测准备于临床中应用的备选治疗方案在PDX模型上的药效能够预测这些治疗方案在肿瘤患者临床治疗中的药效，从而为医生选择合适的治疗方案提供可靠参考。目前，PDX模型对于患者临床用药的一致性已经得到广泛认可。

然而，目前PDX模型建模方法上普遍使用的依然是瘤块接种小鼠皮下的方法，该方法成功率有限，往往造成大量建模不成功的情况，常见生长缓慢、边生长边坏死、生长不稳定、无法快速生长扩大等问题，不仅产生较大的成本支出，同时也无法满足患者个体化医疗模型建模的需求。因此，PDX模型建模成功率低、周期长，是造成目前精准医疗实验不成功的主要原因。

发明内容

基于此，有必要提供一种可提高建模成功率和建模速度的PDX建模佐剂。

一种PDX建模佐剂，包括转化生长因子β、表皮细胞生长因子、碱性成纤维细胞生长因子、血管内皮生长因子、胰岛素、氢化可的松、Y-27632、胎牛血清和溶剂。