[发明专利]多臂聚乙二醇封堵的大孔硅肽纳米控释系统及制备与应用

权利要求书

1.多臂聚乙二醇封堵的大孔硅肽纳米控释系统，其特征在于由经酸敏感性酸酐功能化的大孔二氧化硅纳米粒子和多臂聚乙二醇组成；在大孔二氧化硅纳米粒子的孔中物理包埋肽类抗癌药物，多臂聚乙二醇作为堵孔剂覆盖在酸敏感性酸酐功能化的大孔二氧化硅纳米粒子表面。

2.如权利要求1所述多臂聚乙二醇封堵的大孔硅肽纳米控释系统，其特征在于所述酸敏感性酸酐采用顺式乌头酸酐；

所述多臂聚乙二醇可为8Arm-PEG-NH₂、6Arm-PEG-NH₂或4Arm-PEG-NH₂；所述多臂聚乙二醇的分子量在5000～20000之间，其末端功能基团为氨基。

3.如权利要求1所述多臂聚乙二醇封堵的大孔硅肽纳米控释系统，其特征在于所述酸酐功能化的大孔二氧化硅纳米粒子和多臂聚乙二醇的连接方式为静电吸附；

所述肽类抗癌药物包含但不局限于Bcl-2功能转换肽。

4.如权利要求1所述多臂聚乙二醇封堵的大孔硅肽纳米控释系统的制备方法，其特征在于包括以下步骤：

1)氨基修饰的大孔二氧化硅纳米粒溶于冷的N,N-二甲基甲酰胺，超声分散均匀，加入三乙胺，搅拌均匀，得混合溶液A；

2)取顺式乌头酸酐粉末，用冷的N,N-二甲基甲酰胺溶解后，在氮气保护下，于冰上加入步骤1)所得混合溶液A中，搅拌反应，离心、洗涤得酸敏感性酸酐功能化的大孔二氧化硅纳米粒M-CA；

3)取步骤2)所制备的M-CA溶于无菌PBS中，超声分散后加入N9肽，搅拌反应，洗涤得负载N9肽的M-CA，记为N9@M-CA；

4)取步骤3)所制备的N9@M-CA溶于超纯水中，超声分散均匀后，加入多臂聚乙二醇水溶液，混合后搅拌反应，洗涤得负载N9肽的多臂聚乙二醇封堵的大孔硅肽纳米控释系统。

5.如权利要求4所述多臂聚乙二醇封堵的大孔硅肽纳米控释系统的制备方法，其特征在于在步骤1)中，所述大孔二氧化硅纳米粒、N,N-二甲基甲酰胺、三乙胺的配比为(10～100mg)︰(2.5～25mL)︰(25～250μL)；其中，大孔二氧化硅纳米粒以质量计算，N,N-二甲基甲酰胺和三乙胺以体积计算。

6.如权利要求4所述多臂聚乙二醇封堵的大孔硅肽纳米控释系统的制备方法，其特征在于在步骤2)中，所述顺式乌头酸酐、N,N-二甲基甲酰胺、混合溶液A的配比为(30～300mg)︰(0.3～3mL)︰(2.2～22mL)；其中，顺式乌头酸酐以质量计算，N,N-二甲基甲酰胺和混合溶液A以体积计算；搅拌反应可于4℃下搅拌反应6～24h；所述离心的转速可为14000rpm，离心的时间可为30min。

7.如权利要求4所述多臂聚乙二醇封堵的大孔硅肽纳米控释系统的制备方法，其特征在于在步骤3)中，所述M-CA与N9肽的质量比为10︰1；搅拌反应的时间可为6～24h。

8.如权利要求4所述多臂聚乙二醇封堵的大孔硅肽纳米控释系统的制备方法，其特征在于在步骤4)中，所述N9@M-CA︰多臂聚乙二醇的质量比为1︰(5～10)；多臂聚乙二醇加入量为50～100mg/mL；搅拌反应的时间可为6～24h；所述多臂聚乙二醇以静电吸附形式附于大孔二氧化硅表面。

9.如权利要求1所述多臂聚乙二醇封堵的大孔硅肽纳米控释系统与雷公藤红素联合协同高效地在Bcl-2靶点丰富的癌症治疗药物中应用，或在克服耐药性癌症的治疗药物中应用。

10.如权利要求9所述应用，其特征在于所述应用的具体用法为，负载肽类抗癌药物的介孔硅纳米控释系统的体外细胞用量是50～200ug/mL，对应N9肽的用量是4.07～16.28ug/mL；小鼠体内剂量为50～100mg/kg，对应N9肽的剂量为4.07～8.14mg/kg；所用雷公藤红素为低剂量的雷公藤红素，体外细胞用量为0.15～0.8μg/mL,小鼠体内剂量为0.4～0.8mg/kg。