[发明专利]一种适应无血清培养基环境的WAYNE293 LVPRO细胞及其应用

说明书

本发明公开了一种适应无血清培养基环境的WAYNE293LVPRO细胞及其应用。人胚胎肾细胞WAYNE 293于2021年5月24日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，邮政编码：100101，保藏编号为：CGMCC No.22348。本发明的人胚胎肾细胞WAYNE 293可以在不含抗结团剂的无血清培养基中悬浮培养的HEK293细胞，同时具有倍增时间短，生长密度高以及病毒包装效率高等特性，是对细胞及基因治疗领域进行工业化开发的重要支持。

技术领域：

本发明属于细胞领域，具体涉及一种适应无血清培养基环境、倍增时间短、细胞生长密度高，病毒包装效率高的WAYNE293 LVPRO细胞及其应用。

背景技术：

随着细胞和基因治疗行业的发展，利用病毒载体对目的基因进行导入的方法以及成为人类治疗先天性遗传病、白血病、癌症等重大疾病的新的方向。

目前病毒载体的制备主要采用以HEK293为宿主细胞，利用阳离子聚合物等化学试剂进行瞬时转染的方法进行。这是由于HEK293相较于其他细胞来说，在瞬时转染的效率以及病毒包装产量都有一定的优势。但是目前大部分已经上市的基因和细胞治疗药物采用的仍然是贴壁培养，如在HKE293细胞培养的过程中采用胎牛血清+基础培养基的方式。贴壁培养的在产业化的后期有着难以克服的困难，因为细胞的数量受制于培养瓶的表面积，故在大规模工业化生产的过程中想要对病毒载体的生产规模进行放大，投入的设备及人工将极大的增加病毒载体的制备成本，同时，由于贴壁培养的工艺目前仍需加入动物来源成分胎牛血清作为必须的细胞培养原料，这将会在基因和细胞治疗产品的安全性方面带来不可避免的风险。

另外，在现有的无血清悬浮培养HEK293技术平台上，由于对后续的瞬时转染效率的追求，一般会减少甚至完全取消抗结团剂在培养基中的使用，而HEK293细胞作为一种人胚肾细胞，在进行无血清悬浮培养的过程中又极易产生细胞结团的情况，从而极大的影响细胞活率，密度以及转染效率。

所以，找到一种可以在不含抗结团剂的无血清培养基中悬浮培养的HEK293细胞，同时具有倍增时间短，生长密度高以及病毒包装效率高等特性的HEK293细胞是对细胞及基因治疗领域进行工业化开发的重要支持。

发明内容：

本发明的第一个目的是提供一种可以在不含抗结团剂的无血清培养基中悬浮培养的HEK293细胞，同时具有倍增时间短，生长密度高以及病毒包装效率高等特性的HEK293细胞-人胚胎肾细胞WAYNE 293。

本发明的人胚胎肾细胞WAYNE 293于2021年5月24日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，邮政编码：100101，保藏编号为：CGMCC No.22348。

本发明的第二个目的是提供上述人胚胎肾细胞WAYNE 293作为宿主细胞在蛋白表达生长、病毒载体的表达生产或疫苗生产中的应用。

所述的蛋白可以为抗体。

本发明的第三个目的是提供上述人胚胎肾细胞WAYNE 293作为宿主细胞在制备细胞或基因治疗领域药物中的应用。

本发明的人胚胎肾细胞WAYNE 293可以在不含抗结团剂的无血清培养基中悬浮培养的HEK293细胞，同时具有倍增时间短，生长密度高以及病毒包装效率高等特性，是对细胞及基因治疗领域进行工业化开发的重要支持。

人胚胎肾细胞WAYNE 293于2021年5月24日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，邮政编码：100101，保藏编号为：CGMCC No.22348。

附图说明：

图1是本发明的WAYNE 293LVPRO细胞的筛选流程；