[发明专利]一种人工诱导石斑鱼三倍体的方法

说明书

本发明涉及鱼类遗传育种领域，特别涉及一种人工诱导石斑鱼三倍体的方法。该方法包括如下步骤：将精子和卵子混合，进行人工受精；受精4.5～5.5min后，将受精卵置于预冷的海水中进行冷休克处理；冷休克处理的温度为0～10℃，时间为10～20min。本发明制备人工诱导三倍体石斑鱼的方法实现了石斑鱼冷休克诱导石斑鱼卵子，可培育出人工三倍体鱼苗，可实现获取多倍体鱼苗，提高了多倍体育苗效率。本技术操作方便、高效实用。

技术领域

本发明涉及鱼类遗传育种领域，特别涉及一种人工诱导石斑鱼三倍体的方法。

背景技术

通过远缘杂交产生多倍体是生物界普遍存在的现象。杂交产生多倍体不仅可能拥有杂种优势，而且不育的多倍体与它的双亲和普通的杂交子代比较，在体型、抗病、抗逆性、成活力、生存力等方面表现出更大的优势。从细胞遗传学角度来看，三倍体为非偶数染色体组，故阻碍了生殖细胞正常的减数分裂，结果常常导致性腺不能发育。在杂交三倍体中，即杂交受精卵通过三倍体诱导技术处理而培育出的三倍体，其不育性更高于普通三倍体。不育的三倍体经济鱼类因为没有性成熟阶段性腺发育的能量损耗，所以避免了性腺发育阶段的生长停滞和死亡率增加，且能量从配子生产转移到体细胞生长中，使得三倍体个体具有更快的生长速度，在生长能力方面具有潜在益处。目前已知的培育出的技术成熟的有三倍体鲤，它生长速度超过普通二倍体野鲤25％～30％，三倍体鲫鱼比二倍体生长速度快1～1.5倍。

石斑鱼(Epinephelus)具有富含营养、肉质鲜美、低脂肪、高蛋白等特点，具有很高的营养价值和经济价值，是我国沿海地区和东南亚重要的养殖鱼类之一。杂交三倍体具有巨大的市场潜力和商业价值，能够大大加快产品上市时间且得到质量更高的个体。

公开号为CN 103004653 A的中国发明专利公开了一种三倍体石斑鱼的制备方法，挑选遗传距离为0.140-0.145亲缘关系的不同种石斑鱼作为亲鱼，采用干法人工授精进行远缘杂交，卵子受精后转移到海水中进行冷体克处理，育苗经起捕、暂养后，进行三倍体鉴定。其中，卵子受精后转移到海水中进行冷休克处理，冷休克处理时的温度为4℃，冷休克处理时间为20～25min。

发明内容

有鉴于此，本发明提供了一种人工诱导石斑鱼三倍体的方法。通过该方法实现获得三倍体石斑鱼群体。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了一种人工诱导石斑鱼三倍体的方法，包括如下步骤：

将精子和卵子混合，进行人工受精；

受精4.5～5.5min后，将受精卵置于预冷的海水中进行冷休克处理；冷休克处理的温度为0～10℃，时间为10～20min。

作为优选，精子与卵子的体积比为1：(50～150)。

在本发明提供的具体实施例中，精子与卵子的体积比为1：100。

作为优选，人工授精的方法为干法授精或湿法授精。

作为优选，受精5min后，对受精卵进行冷休克处理。

作为优选，冷休克处理的温度为1～9℃，时间为12.5～20min。

优选地，冷休克处理的温度为1～9℃，时间为17.5～20min。

更优选地，冷休克处理的温度为1～3℃或7～9℃，时间为20min。

更优选地，冷休克处理的温度为4～6℃，时间为17.5min。

在本发明中，精子为鞍带石斑鱼的精子。但本发明并非限定于此，其它种类的石斑鱼同样可实现本发明的技术效果。

在本发明中，卵子为棕点石斑鱼的卵子。但本发明并非限定于此，其它种类的石斑鱼同样可实现本发明的技术效果。