[发明专利]一种原位负载聚多巴胺的壳聚糖复合支架材料及其制备方法

权利要求书

1.一种原位负载聚多巴胺的壳聚糖复合支架材料的制备方法，其特征在于：由壳聚糖和盐酸多巴胺相互融合构成支架主体多级分层结构，可溶性钙盐与可溶性磷酸盐作为无机相纳米羟基磷灰石的前驱体，采用碳酸铵扩散法诱导盐酸多巴胺自聚合，使材料表面原位负载聚多巴胺，后经Tris溶液处理，原位仿生构建纳米羟基磷灰石掺杂的骨修复支架材料；

包括以下步骤：

（1）称取1 g的壳聚糖溶于50 ml的乙酸溶液中，置于恒温水浴锅中搅拌使其溶解，配置2 wt%的壳聚糖溶液；

（2）称取一定量的盐酸多巴胺，加入步骤（1）所得的壳聚糖溶液，恒温水浴搅拌使其溶解，混合均匀；

（3）将浓度为2 mol/L可溶性钙盐溶液和1.2 mol/L可溶性磷酸盐溶液各2 ml依次加入步骤（2）所得的壳聚糖和盐酸多巴胺的混合溶液，恒温水浴充分搅拌，混合均匀，即得支架前驱体溶液；

（4）将步骤（3）所得的支架前驱体溶液加入模具中，将模具先放于4 ℃过夜，后放于-20℃冷冻24 h，随后真空冷冻干燥；

（5）取容积为500 ml的烧杯，在烧杯底部放入装有碳酸铵粉末的培养皿，后将冷冻干燥得到的支架材料放入烧杯中，用铝箔纸将支架材料与碳酸铵粉末分隔开，用封口膜将烧杯口密封，将烧杯放置于恒温培养箱中；

（6）将步骤（5）所得处理后支架材料，浸泡于250~500 ml的乙醇/Tris混合溶液中，并置于37 ℃恒温摇床中浸泡8~10 h后，用大量二次水冲洗，洗至中性，去除支架内残余的Tris成分，将支架材料放于-20 ℃冷冻，后冷冻干燥，即得原位负载聚多巴胺的壳聚糖复合支架；

步骤（5）中所述的碳酸铵的用量为5 g，铝箔纸上扎有小孔，便于碳酸铵分解后产生的氨气与支架材料相接触，使支架材料处于碱性的气体氛围，促进聚多巴胺的生成，恒温烘箱的温度为37 ℃，放置时间48 h。

2. 根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤（1）、（2）、（3）中所述的水浴的温度均为37 ℃，步骤（1）所用的乙酸溶液的乙酸体积分数为1 %，搅拌时间为2~3 h，使壳聚糖完全溶于乙酸溶液中。

3. 根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤（2）中所述的盐酸多巴胺的加入量为壳聚糖质量的10%~30%，搅拌时间为1 h。

4. 根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤（3）中所用可溶性钙盐为硝酸钙或氯化钙；所用可溶性磷酸盐为磷酸氢二钾、磷酸二氢钾、磷酸氢二钠或磷酸二氢钠；其中Ca/P摩尔比为n(Ca²⁺):n(PO₄^3-)=1.67:1，搅拌时间为3~4 h。

5. 根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤（4）和（6）中冷冻干燥的温度为-80 ℃，冷冻干燥时间为48 h。

6. 根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤（6）中所述的乙醇/Tris混合溶液是将无水乙醇和Tris溶液按照体积比1:1进行混合，无水乙醇的挥发性有利于支架材料与溶液充分接触，使晶体原位均匀转化，所用的Tris溶液的浓度为10 mmol/L，摇床转速为100 r/min。

7.如权利要求1-6任一所述的制备方法制得的原位负载聚多巴胺的壳聚糖复合支架材料。