[发明专利]小儿肺热咳喘颗粒中连翘苷的含量测定方法

说明书

本发明提供一种小儿肺热咳喘颗粒中连翘苷的含量测定方法，以戊烷磺酸钠‑磷酸二氢铵‑乙腈混合液为流动相A，以甲酸‑甲醇‑乙腈混合液为流动相B，检测波长为240～260nm，采用高效液相色谱法进行检测。并对本发明测定方法进行了方法学验证，相比较现有检测技术对本品含量的测定方法，本发明的小儿肺热咳喘颗粒中连翘苷含量测定的分析方法，能够精准测定小儿肺热咳喘颗粒中连翘苷的含量，具有高效、快捷、准确的等优点，提高了检测的准确性，减少了人为操作的误差。

技术领域

本发明涉及连翘苷含量测定领域，特别涉及小儿肺热咳喘颗粒中连翘苷的含量测定方法。

背景技术

小儿肺热咳喘颗粒为十一味中药的复方制剂，具有清热解毒、宣肺止咳、化痰平喘的功能，主要用于感冒、支气管炎、喘息性支气管炎、支气管肺炎属痰热壅肺证者。连翘：性味“苦，微寒。”。功效与主治“清热解毒，消肿散结，疏散风热。用于痈疽，瘰疬，乳痈，丹毒，风热感冒，温病初起，温热人营，高热烦渴，神昏发斑，热淋涩痛。中药提取物粘性较大，与辅料混合制成颗粒剂，辅料会干扰连翘苷含量的检测，影响检测结果的准确性。例如，《中国药典》2020年版第一部中连翘苷质量检测标准，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-水(25：75)为流动相；检测波长为277nm，但在所获得的HPLC谱图中连翘苷峰分离不够明显，连翘苷峰保留时间偏长。CN201410386728.2一种原料药连翘苷苷的质量检测方法，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(4.6mm×250mm，ODS2，5μm)；乙腈(A)-水(B)为流动相；梯度洗脱：0min(25％A)→12min(25％A)→15min(65％A)→20min(65％A)→25min(25％A)→30min(25％A)；流速为1.0mL/min；柱温30℃；检测波长为277nm，该检测方法不适用于小儿肺热咳喘颗粒中连翘苷的含量测定。

发明内容

鉴以此，本发明提出一种专属性强、准确度高的检测方法，检测小儿肺热咳喘颗粒中连翘苷的含量。

本发明的技术方案是这样实现的：

(1)取小儿肺热咳喘颗粒，用质量浓度为0.8～1.2％N,N-二甲基甲酰胺甲醇溶液溶解，配制成贮备液，贮备液浓度为1～5mg/ml；

(2)量取步骤(1)贮备液置于量瓶中，用溶剂稀释，作为供试品溶液，供试品浓度为0.01～0.05mg/ml；

(3)将供试品溶液注入到高效液相色谱仪中进行检测，确定小儿肺热咳喘颗粒中连翘苷含量，

其中，高效液相色谱法的色谱条件如下：

色谱柱：C18色谱柱，

流动相A：戊烷磺酸钠-磷酸二氢铵-乙腈，使用盐酸溶液调节pH值至3.0～3.5，

流动相B：甲酸-甲醇-乙腈，

流速：1～2ml/min，

柱温：25～35℃，

检测波长：240～260nm；

洗脱条件为：

S1:第0～13.0min，流动相A与流动相B的体积比为55～60:40～45；

S2:第13.01～17.0min，流动相A与流动相B的体积比为25～30:70～75；

S3:第17.01～20.0min，流动相A与流动相B的体积比为55～60:40～45。

进一步的，流动相A中戊烷磺酸钠溶液和磷酸二氢铵溶液和乙腈的体积比为(25～30)：(40～45)：(25～35)。

进一步的，溶剂由流动相A和流动相B混合而成，流动相A和流动相B体积比为3～5：1～2。