[发明专利]多肽及其应用和用于检测胞内劳森氏菌抗体的试剂盒

说明书

本发明提供一种多肽及其应用和用于检测胞内劳森氏菌抗体的试剂盒。所述多肽具有SEQ ID No.1所示的氨基酸序列或与SEQ ID No.3所示氨基酸序列具有85％以上同源性的氨基酸序列。所述多肽优选是利用原核细胞外源表达并纯化得到的重组多肽。根据本发明的所述多肽的应用，将所述多肽用于制备检测胞内劳森氏菌抗体的制剂或制品。本发明的多肽制备方法简单、免疫反应性良好，基于该多肽制备的检测胞内劳森氏菌抗体的试剂盒，具有操作简单、使用方便、敏感性高、特异性强、准确性高、重复性好等优点。

技术领域

本发明属于农业生物技术领域，具体涉及多肽及其应用以及用于检测胞内劳森氏菌抗体的试剂盒。

背景技术

胞内劳森氏菌(Lawsonia Intracellularis，LI)寄生于肠道细胞内，可引起猪增生性肠炎(Porcine proliferative enteropathy，PPE)，该病以回肠、盲肠及结肠前端未成熟的肠细胞瘤样增生为特征；临床常呈现急性型、亚临床型和慢性型；其中慢性型最为常见；该病潜伏期长，感染率高，死亡率低，全球呈散发性流行。

1931年首次报道该病，随后欧洲、美洲、澳洲、亚洲等主要生猪生产国都相继出现该病的相关报道。根据我国目前的有关调查研究显示，我国各地区猪增生性肠炎的感染呈上升趋势，大多猪只临床表现并不明显，采食量及粪便均正常，但猪只生长缓慢，严重影响料肉比，增加饲养成本，给养猪业造成了严重损失。

目前，LI抗体的检测方法处于发展阶段，操作复杂、耗时长、灵敏度较低、特异性较低、准确性较低，尚无国产商品化检测试剂盒。

发明内容

本发明的目的一方面在于提供一种多肽，所述多肽具有SEQ ID No.1所示的氨基酸序列或与SEQ ID No.3所示氨基酸序列具有85％以上同源性的氨基酸序列。

优选地，所述多肽是由具有SEQ ID No.2所示DNA序列或者与SEQ ID No.2所示DNA序列具有78.8％以上同源性的DNA序列的基因所编码的。

优选地，所述多肽是利用体外表达系统外源表达并纯化得到的重组多肽。

优选地，所述多肽是利用原核细胞外源表达并纯化得到的重组多肽。

本发明另一方面还提供所述多肽的应用，将所述多肽用于制备检测胞内劳森氏菌抗体的制剂或制品。

根据本发明所述的多肽的应用，优选将所述多肽用于制备检测胞内劳森氏菌抗体的试剂盒和/或胶体金检测试纸条。

本发明还提供一种用于检测胞内劳森氏菌抗体的ELISA试剂盒，其包括ELISA反应板，所述ELISA反应板的各反应孔内预包被有本发明所提供的多肽。

优选地，所述ELISA试剂盒还包括阴性对照血清、阳性对照血清、酶标二抗、洗涤液、样品稀释液、显色液和终止液。

优选地，所述ELISA反应板是用浓度为20ng/mL以上的所述多肽溶液预包被后的反应板。

本发明所提供的用于检测胞内劳森氏菌抗体的多肽具有免疫反应性良好的特点，检测胞内劳森氏菌时，检测敏感性高、特异性强、准确性高。

本发明的另一目的是提供所述多肽的制备方法，采用该方法能够大量可溶性表达该多肽，免疫反应性良好，制备方法简单。

本发明的再一目的是提供检测胞内劳森氏菌抗体的试剂盒，操作简单、耗时短、敏感性高、特异性强、准确性高、重复性好。

本发明的目的采用如下技术方案实现。

本发明提供一种用于检测胞内劳森氏菌抗体的多肽，其氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。