[发明专利]邻苯二酚双加氧酶突变体、重组载体及其制备方法和应用在审
申请号: | 202110693671.0 | 申请日: | 2021-06-22 |
公开(公告)号: | CN113308444A | 公开(公告)日: | 2021-08-27 |
发明(设计)人: | 江晶洁;马富强;张艺凡;岳婕;杨广宇 | 申请(专利权)人: | 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所 |
主分类号: | C12N9/02 | 分类号: | C12N9/02;C12N15/53;C12N15/70;C12N1/21;C12R1/19 |
代理公司: | 北京远大卓悦知识产权代理有限公司 11369 | 代理人: | 贺杰 |
地址: | 215163 江苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 邻苯二酚 双加氧酶 突变体 重组 载体 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种突变型邻苯二酚双加氧酶,其特征在于,所述突变型邻苯二酚双加氧酶为如下(a1)或(a2):
(a1)由SEQ ID No.2所示的氨基酸序列经缺失、替代或增加一个或多个氨基酸得到的与SEQ ID No.2所示的氨基酸序列组成的多肽具有相同功能的多肽;
(a2)与SEQ ID No.2所示的氨基酸序列组成的多肽具有至少90%同源性的多肽。
2.根据权利要求1所述的突变型邻苯二酚双加氧酶,其特征在于,所述突变型邻苯二酚双加氧酶是在SEQ ID No.2所示的氨基酸序列上进行突变得到的,突变位点选自A95V、L148S、R193Q、L248D中的一种或一种以上的组合。
3.根据权利要求1所述的突变型邻苯二酚双加氧酶,其特征在于,所述突变位点为A95V、L148S、R193Q、L248D、A95V-L148S、L148S-R193Q、A95V-L248D、R193Q-L248D、A95V-R193Q、L148S-L248D、A95V-L148S-R193Q、A95V-L148S-L248D、A95V-R193Q-L248D、L148S-R193Q-L248D或A95V-L148S-R193Q-L248D。
4.根据权利要求1所述的突变型邻苯二酚双加氧酶,其特征在于,A95V单位点突变对应的突变型邻苯二酚双加氧酶的氨基酸序列如SEQ ID No.3所示;
L148S单位点突变对应的突变型邻苯二酚双加氧酶的氨基酸序列如SEQ ID No.4所示;
R193Q单位点突变对应的突变型邻苯二酚双加氧酶的氨基酸序列如SEQ ID No.5所示;
L248D单位点突变对应的突变型邻苯二酚双加氧酶的氨基酸序列如SEQ ID No.6所示;
A95V-L148S组合位点突变对应的突变型邻苯二酚双加氧酶的氨基酸序列如SEQ IDNo.7所示;
L148S-R193Q组合位点突变对应的突变型邻苯二酚双加氧酶的氨基酸序列如SEQ IDNo.8所示;
A95V-L248D组合位点突变对应的突变型邻苯二酚双加氧酶的氨基酸序列如SEQ IDNo.9所示;
R193Q-L248D组合位点突变对应的突变型邻苯二酚双加氧酶的氨基酸序列如SEQ IDNo.10所示;
A95V-R193Q组合位点突变对应的突变型邻苯二酚双加氧酶的氨基酸序列如SEQ IDNo.11所示;
L148S-L248D组合位点突变对应的突变型邻苯二酚双加氧酶的氨基酸序列如SEQ IDNo.12所示;
A95V-L148S-R193Q组合位点突变对应的突变型邻苯二酚双加氧酶的氨基酸序列如SEQID No.13所示;
A95V-L148S-L248D组合位点突变对应的突变型邻苯二酚双加氧酶的氨基酸序列如SEQID No.14所示;
A95V-R193Q-L248D组合位点突变对应的突变型邻苯二酚双加氧酶的氨基酸序列如SEQID No.15所示;
L148S-R193Q-L248D组合位点突变对应的突变型邻苯二酚双加氧酶的氨基酸序列如SEQ ID No.16所示;
A95V-L148S-R193Q-L248D组合位点突变对应的突变型邻苯二酚双加氧酶的氨基酸序列如SEQ ID No.17所示。
5.一种编码如权利要求1-3中任意一项所述的突变型邻苯二酚双加氧酶的基因,该基因为如下(b1)或(b2):
(b1)由SEQ ID No.1所示的核苷酸序列缺失、替代或增加一个或多个碱基得到的多核苷酸;
(b2)与SEQ ID No.1所示的核苷酸序列组成的多核苷酸具有至少90%同源性的多核苷酸。
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