[发明专利]番茄黄化曲叶病毒和番茄褪绿病毒的单叶嫁接接种方法

说明书

本发明公开了一种番茄黄化曲叶病毒和番茄褪绿病毒的单叶嫁接接种方法，步骤如下：S1、处理砧木：取番茄幼苗或侧枝，选择合适的结点，从结点上移开健康叶片，在受体幼苗的茎上做斜切切口；S2、处理接穗：取长势良好的单叶为接穗材料，将接种单叶的叶柄削成楔形；S3、插接嫁接：将接穗斜插入砧木切口中，用嫁接夹固定后培养即可。本发明采用上述的一种番茄黄化曲叶病毒和番茄褪绿病毒的单叶嫁接接种方法，不受传毒介体的影响，不受季节限制，嫁接材料容易获得，操作简便。

技术领域

本发明涉及植物保护技术领域，尤其是涉及一种番茄黄化曲叶病毒和番茄褪绿病毒的单叶嫁接接种方法。

背景技术

番茄黄化曲叶病毒(Tomato yellow leaf curl virus)和番茄褪绿病毒(TomatoChlorosis virus)是烟粉虱传播的2种世界性番茄病毒病害，在我国发生和分布及其广泛，严重危害我国的番茄生产。目前，应用化学药剂防治传毒介体烟粉虱是该类病毒病害的主要防治手段，但烟粉虱极易产生抗药性，化学防治容易造成环境及食品污染，降低农产品质量，因此，使用抗病品种是最根本有效的措施。

番茄品种对烟粉虱传播病毒病的抗性研究是抗性品种生产应用的前提和基础，其中病毒的接种技术是进行番茄品种抗性研究的关键技术。当前进行病毒接种的方法主要包括利用传毒介体烟粉虱、病毒的侵染性克隆及嫁接技术等3种方法进行。生产及科学研究中利用烟粉虱及侵染性克隆的方法进行病毒接种的报道较多，但利用烟粉虱接种需要获得携带不同病毒的烟粉虱群体，由于烟粉虱同时传播番茄黄化曲叶病毒及番茄褪绿病毒，获得携带不同病毒的烟粉虱群体难度较大，接种条件不易控制，在进行病毒与寄主的互作研究中病毒接种准确性受到限制；病毒的侵染性克隆可实现病毒的定时、定量接种，但制备难度较高，开发困难、不易获得，且成本昂贵，难以大范围应用。另外，病毒的嫁接接种技术报道较少，仅于力等人报道曾利用嫁接技术实现了番茄黄化曲叶病毒的嫁接接种，但该方法以发病番茄材料为砧木，以健康番茄材料为接穗，嫁接时仅保留砧木材料的2片真叶，砧木与毒源苗龄需要保持一致，作为毒源的砧木材料仅能使用一次，重复接种需要繁殖大量毒源，耗费较多的人力物力。

发明内容

本发明的目的是提供一种番茄黄化曲叶病毒和番茄褪绿病毒的单叶嫁接接种方法，不受传毒介体的影响，不受季节限制，嫁接材料容易获得，操作简便。

为实现上述目的，本发明提供了一种番茄黄化曲叶病毒和番茄褪绿病毒的单叶嫁接接种方法，步骤如下：

S1、处理砧木：取番茄幼苗或侧枝，选择合适的结点，从结点上移开健康叶片，在受体幼苗的茎上做斜切切口；

S2、处理接穗：取长势良好的单叶为接穗材料，将接种单叶的叶柄削成楔形；

S3、插接嫁接：将接穗斜插入砧木切口中，用嫁接夹固定后培养即可。

优选的，步骤S1中，番茄幼苗或侧枝为生长至4-8周龄。

优选的，步骤S1中，斜切切口的角度为30°，步骤S2中叶柄楔形角度为30°。

优选的，嫁接完的番茄苗放在温湿度可控且无烟粉虱的人工气候箱中，调节气候箱温湿度条件进行培养。

优选的，气候箱中条件设置为：嫁接后至2周内，气候箱全天温度保持25℃，湿度保持90％，全天光照6小时；

嫁接2周后，取下嫁接夹，气候箱温湿度保持不变，光照时间为8小时；

嫁接3周后，将嫁接苗取出后放置于温室阴面防虫网箱中；

嫁接4周后，将嫁接苗放置阳面温室防虫网箱中。

优选的，番茄苗嫁接5周后，开始出现症状。