[发明专利]高密度琼氏不动杆菌及其制备方法及应用在审
申请号: | 202110700358.5 | 申请日: | 2021-06-23 |
公开(公告)号: | CN113388547A | 公开(公告)日: | 2021-09-14 |
发明(设计)人: | 刘三;田会会;钟启平 | 申请(专利权)人: | 宜春强微生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C02F3/30;C02F3/34;C12R1/01 |
代理公司: | 南昌市赣昌知识产权代理事务所(普通合伙) 36140 | 代理人: | 刘鸿运 |
地址: | 336000 江西省*** | 国省代码: | 江西;36 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 高密度 不动 杆菌 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一株琼氏不动杆菌,保藏于中国微物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号:CGMCC NO:22150,保藏培养物名称:琼氏不动杆菌WNO(Acinetobacter junii WNO);保藏日期,2021年4月9日。
2.根据权利要求1所述的一株琼氏不动杆菌,其特征是
其16S rDNA序列如下:
3.根据权利要求1所述的一株琼氏不动杆菌,其特征是其gyrB基因区段序列如下:
4.根据权利要求1所述的一株琼氏不动杆菌的发酵培养方法,采用固体发酵培养工艺,包括如下步骤:
1)、以米糠、麸皮、玉米粉、豆粕中任意一种或几种原料,和保水性树胶作为固态培养基料;
2)、于固态培养基料中加入营养液培养基作为固态发酵培养基;
3)、将固态发酵培养基灭菌后,接入琼氏不动杆菌种子液,经控温培养,干燥,粉碎制得高密度琼氏不动杆菌产品;
所述的营养液培养基各质量组分组成:葡萄糖:0.5-20.0,蛋白胨:1-20.0,牛肉膏:0.5-5.0,酵母膏:1-5.0,硫酸镁:0-0.5,硫酸锰:0-0.2,磷酸氢二钾:0.5-3.0,氯化钠:0-5.0,氯化钙:0-0.5,去离子水:1000,pH 6.0-7.5;
所述的琼氏不动杆菌的种子液与营养液培养基一致,经高温灭菌后接种,液态发酵培养制得。
5.根据权利要求4所述的琼氏不动杆菌的发酵培养方法,其特征是所述采用固体发酵培养工艺,包括:(1)固态培养基料各组分组成按质量比为:米糠:麸皮:玉米粉:豆粕:保水性树胶=1:(10-30):(1.5-2.5):(10-30):(0.05-0.1);
(2)于上步固态培养基料中按质量比固态培养基料:营养液培养基为1:1-1.5的比例加入营养液培养基,并加入饲料用的稀土添加剂,制成固态发酵培养基;
(3)将(2)步制得的固态发酵培养基,湿热灭菌,冷却至室温后接种琼氏不动杆菌种子液,经控温培养、干燥、粉碎制得高密度琼氏不动杆菌产品;所述的琼氏不动杆菌种子液为:葡萄糖:0.5-20.0,蛋白胨:1-20.0,牛肉膏:0.5-5.0,酵母膏:1-5.0,硫酸镁:0-0.5,硫酸锰:0-0.2,磷酸氢二钾:0.5-3.0,氯化钠:0-5.0,氯化钙:0-0.5,去离子水:1000,pH 6.0-7.5,经灭菌冷却后,接种琼氏不动杆菌斜面种子,放置摇床中于30-40℃,180rpm下,震荡培养18-24h制得。
6.依据权利要求4所述的琼氏不动杆菌的发酵培养方法,其特征是所述步骤3)接种琼氏不动杆菌种子液,种子液接入量为固态发酵培养基质量的10-20%,培养过程中控制培养温度30-40℃,时间24-72h。
7.依据权利要求4所述的琼氏不动杆菌的发酵培养方法,其特征是步骤3)所述干燥、粉碎是发酵培养后,物料于35-50℃下通风干燥至含水量10Wt%以下,再粉碎至60-80目即为高密度琼氏不动杆菌发酵成品。
8.依据权利要求4所述的琼氏不动杆菌的发酵培养方法,其特征是所述步骤2)饲料用稀土添加剂为含有铈、镧有效元素的饲料用稀土添加剂;添加剂加入量按照质量比是固态培养基料:营养液培养基:饲料用稀土添加剂为1:1.0-1.5:0.0001-0.00015。
9.根据权利要求1所述的一株琼氏不动杆菌,应用于污水处理的异养硝化好氧反硝化作用。
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