[发明专利]脊髓损伤修复用材料和骨脊髓组织工程支架的制备方法

权利要求书

1.脊髓损伤修复用材料，其特征在于，包括以下组分：有机高分子材料10～40份、有机溶剂50～100份、水2～30份、超分子水凝胶材料10～30份、药物0～1份；所述超分子水凝胶的成分为水、明胶、双键化β－环糊精、分子量700－10000的聚乙二醇双丙烯酸酯(PEGDA)、脊髓细胞外基质和光引发剂，其中水：明胶：双键化β－环糊精：聚乙二醇双丙烯酸酯(PEGDA)：脊髓细胞外基质：光引发剂的质量比为100份：12份：8份：1份：10份：0.1份。

2.根据权利要求1所述的脊髓损伤修复用材料，其特征在于：所述有机高分子材料为聚己内酯(PCL)或聚乙醇酸(PGA)或聚乳酸(PLA)。

3.根据权利要求1所述的脊髓损伤修复用材料，其特征在于：所述有机溶剂为三氟乙醇，水为去离子水。

4.根据权利要求1所述的脊髓损伤修复用材料，其特征在于：所述药物为Oxymatrine(OMT)。

5.一种骨脊髓组织工程支架的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1、制备定向微米纤维：将有机高分子材料溶于有机溶剂中形成有机高分子材料/有机溶剂溶液，混合搅拌均匀得到纤维成型墨水，将该纤维成型墨水转移到3D打印设备中打印得到具有相同方向排列的微米纤维；

S2、风干：将步骤S1得到的微米纤维风干去除溶剂；

S3、配制超分子水凝胶：将水、明胶、双键化β－环糊精、聚乙二醇二丙烯酸酯(PEGDA)、脊髓细胞外基质和光引发剂按预定份数混合加入去离子水中，在37℃条件下充分溶解、搅拌，得到超分子水凝胶前驱体，将水凝胶前驱体放置在300～410nm的紫外光下照射3－10分钟，交联得到超分子水凝胶；

S4、药物负载：将药物Oxymatrine(OMT)加入到制备完成的超分子水凝胶中，并搅拌均匀；

S5、骨脊髓组织工程支架的制备：将负载有Oxymatrine(OMT)的超分子水凝胶涂敷在去除溶剂的微米纤维上，将所述微米纤维卷曲成类圆柱型结构，并进行紫外光照射，通过交联得到骨脊髓组织工程支架。

6.根据权利要求5所述的骨脊髓组织工程支架的制备方法，其特征在于，所述步骤S3中脊髓细胞外基质的获取方法如下：

(1)手术取大鼠胸段脊髓；

(2)通过化学萃取的方法得到大鼠脊髓脱细胞支架(ASC)：将胸段脊髓依次冷冻、浸泡、震荡；详细步骤包括：

①将胸段脊髓－80℃冰箱冷冻1h，室温解冻；

②然后浸入蒸馏水中浸泡6h，每小时换液一次；

③然后将脊髓放入1％的TritonX－100磷酸缓冲液中，在25℃、100r/min的条件下连续振荡萃取3h；

④再用蒸馏水振荡漂洗3h，每小时换液一次；

⑤1％的脱氧胆酸纳缓冲液中室温下连续振荡萃取3h；

⑥再用蒸馏水振荡漂洗3h，每小时换液一次；

⑦再重复③－⑥操作步骤1次；

(3)萃取后的脊髓置4℃、0.01mol/L、pH7.2的无菌PBS溶液中保存备用；

(4)大鼠ASC的冷冻干燥：脊髓去细胞支架置于冷冻干燥机内，将标本冷冻干燥24小时；

(5)大鼠ASC支架的灭菌：将封装好的标本，由3kGy的－60伽马射线灭菌，备用；

(6)取ASC支架将其剪碎、研磨、溶于水，获得脊髓细胞外基质。

7.根据权利要求5所述的骨脊髓组织工程支架的制备方法，其特征在于：所述骨脊髓组织工程支架成品的孔隙率为40～95％，以及孔径为100～2000μm，次级孔径为1～100μm。