[发明专利]一种尿素结晶法分离谷朊粉中酸溶性麦谷蛋白的方法

说明书

本发明一种尿素结晶法分离谷朊粉中酸溶性麦谷蛋白的方法利用含酸尿素溶液可分散麦谷蛋白聚集体的特性，结合高浓度尿素极易结晶的特性分离溶液中尿素和麦谷蛋白。以谷朊粉醇提后所得麦谷蛋白为原料，利用pH为2～5浓度为2～6mol/L尿素溶液搅拌溶解该蛋白，蛋白和尿素液的重量比例为1∶2～1∶6。取上清液采用旋转蒸发仪浓缩尿素液体积至原液的二分之一。将浓缩液置于2～10℃静置12～48h后，置于15～30℃静置18～36h让尿素结晶析出与蛋白分离。将上部固态尿素取出，剩余下部为半固态酸溶性麦谷蛋白。经透析去除少量醋酸和尿素，干燥粉碎后得到粉末状麦谷蛋白。

技术领域

本发明涉及食品加工领域，更具体的说，是一种尿素结晶法分离谷朊粉中酸溶性麦谷蛋白的方法。

背景技术

从谷朊粉中提取麦谷蛋白最早得方法是用65％左右乙醇浸提谷朊粉，醇溶蛋白溶解在乙醇中，剩余沉淀即为麦谷蛋白。但该蛋白是凝聚体，在水中不溶，即使有抗回生功能，也很难作为添加剂在食品面团中应用。目前麦谷蛋白的分离鉴定方法有聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、高效毛细管电泳(HPCE)、双缩脲比色法、凝胶色谱法等，提取剂主要包括十二烷基硫酸钠(SDS)、二硫苏糖醇(DTT)和尿素，用丙酮、含有β-巯基乙醇的异丙醇等去除醇溶蛋白、清球蛋白和其他单体蛋白。麦谷蛋白仍然溶解于提取剂中，不能沉淀析出。现有文献所用提取剂中SDS和DTT均不能在食品领域应用，尿素用于食品添加剂制备过程材料安全性相对较高。本专利是基于含一定浓度醋酸的尿素可将谷朊粉醇提醇溶蛋白后制备的麦谷蛋白聚集体部分溶解，然后在控制温度、尿素浓度条件下让大量尿素结晶析出，再用透析袋除去所有尿素和醋酸，从而制备出酸溶性麦谷蛋白。

发明内容

本发明是为了克服现有技术中的不足之处，利用一种尿素结晶法分离谷朊粉中酸溶性麦谷蛋白，本方法不需要昂贵的设备，不需要丙酮和异丙醇沉淀醇溶蛋白，利用食品安全性更高的含酸尿素溶解麦谷蛋白聚集体，进而利用浓缩液中尿素易结晶的特性将尿素和蛋白分离，透析除去蛋白残留醋酸和尿素，制备出可在稀酸中快速分散的麦谷蛋白单体，方便其在食品领域应用。

本发明通过下述技术方案实现：

一种利用尿素结晶法分离谷朊粉中酸溶性麦谷蛋白的方法，其特征在于：包括下述步骤：

将谷朊粉和65％的乙醇按照质量比1∶20配比混合，在35℃水浴锅里搅拌浸提2-3h使谷朊粉中醇溶蛋白溶于乙醇中；浸提后溶液用离心机在3500r/min条件下离心5min，取沉淀即为麦谷蛋白凝聚体。利用pH为2-5浓度为2～6mol/L尿素溶液搅拌溶解该麦谷蛋白聚集体，蛋白和尿素液的重量比例为1∶2～1∶6。取上清液采用旋转蒸发仪浓缩尿素液，旋转蒸发温度65℃，真空度0.09MPa，蒸发尿素液体积为原液的二分之一。将浓缩液置于2～10℃温度下静置12～48h后，置于15-30℃温度下静置18-36h让尿素结晶析出与蛋白发生分离。将上部固态尿素取出，剩余下部为半固态酸溶性麦谷蛋白。用透析分子量500的透析袋，将半固态酸溶性麦谷蛋白放入透析袋中，常温下透析5-10次，去除其中含有少量醋酸和尿素。经透析去后半固态酸溶性麦谷蛋白进行干燥，干燥温度为40-45℃，干燥时间为24-48h，干燥后蛋白用粉碎机粉碎为粉末状蛋白。

本发明具有下述技术效果：

本发明的方法利用含酸尿素可打开醇提谷朊粉制备所得麦谷蛋白分子间二硫键从而分散麦谷蛋白聚集体的特性，进而利用高浓度尿素极易结晶的特性将溶液中尿素和麦谷蛋白分离开来。将上部固态尿素取出后，下部半固态麦谷蛋白通过透析除去残留尿素和醋酸，制备出可用于食品领域的水易分散麦谷蛋白。制备工艺简单、廉价，结晶析出固态尿素可重复使用，利于环保，该方法是一种绿色环保的制备食品级麦谷蛋白的方法。

说明书附图

图1是含酸溶性麦谷蛋白尿素溶液尿素结晶图(上部为尿素，下部为麦谷蛋白)；

图2是图1中取出的固态尿素结晶图；