[发明专利]一种快速实现甘薯转基因的方法有效

专利信息
申请号: 202110705309.0 申请日: 2021-06-24
公开(公告)号: CN113322274B 公开(公告)日: 2023-03-31
发明(设计)人: 侯兴亮;刘旭;王亚如 申请(专利权)人: 中国科学院华南植物园
主分类号: C12N15/84 分类号: C12N15/84;C12N5/10;A01H5/00;A01H6/00
代理公司: 广州科粤专利商标代理有限公司 44001 代理人: 刘明星;朱聪聪
地址: 510650 广*** 国省代码: 广东;44
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摘要:
搜索关键词: 一种 快速 实现 甘薯 转基因 方法
【权利要求书】:

1.一种快速实现甘薯转基因的方法,其特征在于,包括以下步骤:是将含有目的基因表达载体的根癌农杆菌注射进4至6叶期甘薯的第1、2或3个节点中,先暗培养2天,再置于光下培养,待再次长出小芽和新叶,再次将含有目的基因表达载体的根癌农杆菌注射进4至6叶期甘薯的第1、2或3个节点中,先暗培养2天,再置于光下培养,对注射植株上新长出的不定根、芽或叶,或注射植株结薯后的薯块上新长出的不定根、芽或叶进行DNA检测,获得含有目的基因的甘薯转基因植株或组织;

所述的含有目的基因表达载体的根癌农杆菌,其注射浓度为OD600=0.5;

所述的4至6叶期甘薯是将甘薯薯块用清水洗净并培养至发芽,用灭菌土壤栽培甘薯茎段直到其长至4至6片新叶期。

2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的含有目的基因表达载体的根癌农杆菌是将目的基因转入表达载体中,然后转化进入根癌农杆菌,获得含有目的基因表达载体的根癌农杆菌。

3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的含有目的基因表达载体的根癌农杆菌菌液是将含有目的基因表达载体的根癌农杆菌培养至对数生长期,收集根癌农杆菌,再将其稀释到OD600=0.5。

4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的目的基因为GUS基因,所述的表达载体为pCAMBIA1301。

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