[发明专利]PBK/TOPK在诊断和治疗薄型内膜疾病中的应用

说明书

本发明公开了PBK/TOPK在制备诊断和治疗薄型内膜疾病的试剂中的应用。PBK/TOPK作为检测靶点在制备薄型内膜诊断试剂中的应用。PBK/TOPK在制备治疗子宫内膜薄引起的疾病的药物中的应用。本发明通过测序和生物信息学方法分析发现薄型内膜患者下调基因主要富集在细胞增殖和细胞周期等生物学过程。实验验证薄型内膜患者子宫内膜组织中PBK/TOPK表达显著减少，尤其以间质细胞减少最为显著。体外结果显示，干扰PBK/TOPK后细胞增殖活性下降。因此，PBK/TOPK在薄型内膜检测和治疗方面可能发挥重要作用，可用于薄型内膜的临床诊断及治疗。

技术领域

本发明属于生物制药领域，涉及PBK/TOPK在薄型内膜诊断及治疗中的应用。

背景技术

胚胎植入是妊娠成功的关键环节，成功的植入需要发育良好的胚胎及具有良好容受性的子宫内膜。子宫内膜由单层柱状上皮细胞和富含间质细胞的固有层组成，适当厚度的子宫内膜为受精卵着床所必需。薄型内膜(thin endometrium,TE)是指病人在使用大剂量雌激素刺激后内膜厚度仍无明显提高。然而目前对于薄型内膜厚度的定义尚未达成广泛共识，一般认为是在黄体中期(排卵后6～10d)，子宫内膜厚度7mm。其主要临床特征为月经周期正常但月经量过少(30ml)。我们在临床工作中发现，有很大比例的薄型内膜患者是由于宫腔手术所致。由于发病机制不清，目前薄型子宫内膜尚无公认的有效治疗方法。近年来，随着宫腔镜操作及无痛人流术的增加，在我国TE的发生率呈上升趋势。因此，亟待寻找有效的预测及治疗薄型内膜的方法。

PDZ结合激酶(PBK)/T-淋巴因子激活的杀伤细胞源性蛋白激酶TOPK是一种丝-苏氨酸激蛋白酶，由激酶亚结构域和锌指结合域组成,据报道，在增殖细胞和组织中表达。PBK/TOPK调控细胞许多重要的生理功能，包括调控细胞有丝分裂、细胞增殖和细胞周期进程等。PBK/TOPK与薄型内膜是否存在关联，迄今未见报道。我们的研究发现，通过对薄型内膜患者子宫内膜组织中PBK/TOPK表达水平检测，能够为其诊断、治疗和严重程度评估提供可靠的依据。

发明内容

本发明的目的是提供一种PBK/TOPK在诊断子宫内膜薄相关疾病中的应用。

本发明的目的通过以下技术方案实现：

PBK/TOPK在诊断薄型内膜中的应用，所述的检测PBK/TOPK表达水平的试剂为PBK/TOPK基因的特异性引物序列(如PCR引物或qPCR引物)或者检测PBK/TOPK蛋白的抗体。

本发明中所述的薄型内膜是指由于子宫内膜基底层损伤，功能层再生修复障碍，形成以内膜增生不良和纤维化为特征的薄型内膜。

本发明中所述的子宫内膜薄引起的疾病指薄型内膜以及由此导致的子宫性不孕、反复流产及胎盘植入等。

本发明的有益效果为：

本发明通过转录组测序发现，在薄型内膜患者子宫内膜中，PBK/TOPK表达显著下降。免疫组化结果表明，与对照组相比，PBK/TOPK在薄型患者间质细胞中的减少最为显著。体外结果也证实，在间质细胞中干扰PBK/TOPK表达后，间质细胞增殖受到抑制。因此，PBK/TOPK在薄型内膜的诊断及治疗方面可能发挥重要作用，为薄型内膜的诊断、治疗和病情评估提供一个可靠的依据。

附图说明

图1、A：由MCODE筛选出的最重要模块的蛋白质相互作用网络；绿色表示在薄型内膜患者中表达下调；B：对MCODE最重要模块差异表达基因的基因本体论(GO)分析。

图2、A：qPCR检测子宫内膜组织中PBK/TOPK的mRNA水平；B：免疫组化分析子宫内膜组织中PBK/TOPK的表达量；

图3、A：CCK8测定干扰PBK/TOPK后细胞增殖活性的改变。

图4、A：子宫内膜组织中PBK/TOPK表达水平的ROC曲线。

具体实施方式