[发明专利]一种乙炔基硫盐点击反应的蛋白标记方法有效
| 申请号： | 202110708506.8 | 申请日： | 2021-06-23 |
| 公开（公告）号： | CN113447464B | 公开（公告）日： | 2022-07-12 |
| 发明（设计）人： | 李子刚;尹丰;王跃娜;侯占峰;万川 | 申请（专利权）人： | 北京大学深圳研究生院;深圳湾实验室坪山生物医药研发转化中心 |
| 主分类号： | G01N21/64 | 分类号： | G01N21/64 |
| 代理公司： | 上海政济知识产权代理事务所(普通合伙) 31479 | 代理人： | 辇甲武 |
| 地址： | 518055 广东省深*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 乙炔 基硫盐 点击 反应 蛋白 标记 方法 | ||
1.一种乙炔基硫盐点击反应的蛋白标记方法，其特征在于：所述方法包括将待测样品R经叠氮化试剂修饰后，与乙炔基硫盐发生点击反应，化学反应式为：
，
其中，2为乙炔基硫盐，4为经叠氮修饰的待测样品，3为生成的1,5-三唑环加成产物；乙炔基硫盐2选自2a-2n中的一种，2a-2n的具体结构如下所示：
、、、、、、、、、、、、、。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述待测样品选自纯白蛋白、复杂蛋白体系或活细胞中的一种。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述叠氮化试剂为IAA-Az，结构式为：
。
4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于：所述待测样品为牛白蛋白，叠氮化试剂为IAA-Az，牛白蛋白和叠氮化试剂IAA-Az在室温下反应一小时后，在37℃，pH 7.4的磷酸盐缓冲盐水中与乙炔基硫盐孵育1 小时。
5.根据权利要求3所述的方法，其特征在于：所述待测样品为细胞裂解液，叠氮化试剂为IAA-Az，经叠氮化试剂IAA-Az修饰后的细胞裂解液与乙炔基硫盐ROX-AS在25℃、pH 7.4的磷酸盐缓冲盐水孵育1小时，乙炔基硫盐ROX-AS结构式为：
。
6.根据权利要求3所述的方法，其特征在于：所述待测样品为细胞，叠氮化试剂为IAA-Az，细胞与IAA-Az孵育3小时后，与乙炔基硫盐ROX-AS在25℃、pH 7.4的磷酸盐缓冲盐水孵育2小时。
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