[发明专利]一种培养脂肪间充质干细胞球状体的方法

权利要求书

1.一种培养脂肪间充质干细胞球状体的方法，包括如下步骤：

S1将细胞密度80％的人脂肪间充质干细胞进行解离；

S2离心并确认细胞团块在15ml离心管底，然后加入6ml培养基均匀混合；

S3使用6公分培养皿，移液量调整为25-27uL，下盘加入PBS缓冲液7ml，确保细胞滋润度，上盘扑满细胞点，小心转过并覆盖到下盖上，放入培养箱3天；

S4三天后慢慢的冲洗下，此为干细胞球状细胞团块液，离心转速1500rpm5分钟；

S5将上清液弃掉，确认管底细胞团块，加入2ml培养液混合；

S6显微镜下确认团块，数细胞团块，确保细胞团块的数量在50颗以上；

S7使用96孔盘，每一个孔打入50uL；

S8球状细胞液打入Hystem水凝胶细胞培养支架，之后每2-3天换液一次，持续培养7-14天；

S9检测分析：(1)细胞染色；(2)分析细胞团块直径大小与数量；(3)共轭胶显微镜3D影像。