[发明专利]玉米干旱诱导型启动子ZmOMAp1730及应用

说明书

本发明公开了一种玉米干旱诱导型启动子ZmOMAp1730及应用，属于农业生物技术领域。具体公开一种获得的玉米干旱诱导型启动子ZmOMAp1730，其核苷酸序列如SEQ ID NO：1中第1‑1730位碱基序列所示。还公开了包括扩增所述玉米诱导型启动子ZmOMAp1730的引物以及玉米诱导型启动子ZmOMAp1730的应用。本发明通过实验验证ZmOMAp1730基因启动子响应干旱胁迫，并受干旱胁迫正向调控，该发现对于植物干旱调控以及进行抗旱育种具有重要意义。

技术领域

本发明涉及农业生物技术领域，特别是涉及一种玉米干旱诱导型启动子ZmOMAp1730及应用。

背景技术

植物基因的启动子按其基因的表达方式分为组成型启动子、诱导型启动子和组织特异性启动子。其中，组成型启动子在农业生物技术上应用的较多，比如CAM35S启动子和玉米Ubiquitin-1启动子，这些启动子虽然已经得到应用，但是组成型启动子会启动目的基因在植物所有组织中持续稳定高表达，造成细胞内的物质和能量过度消耗，目的基因表达的时空性不能有效控制，会造成植物体内原有的代谢平衡紊乱，以致植物正常生长受到阻碍，因此实践运用中存在一定的缺陷。同一组成型启动子重复驱动多个外源基因表达还可能会引起基因沉默或共抑制现象。因此，有必要针对不同的组织器官特异性或者特定条件下诱导表达启动子，这样就可以根据需要选择不同的启动子诱导目的基因进行表达。

尽管目前已经有针对玉米诱导型启动子的相关报道，但是由于不同基因所具有的功能可能存在差异，并且也并非所有基因的功能都已经被人类所知，而干旱是影响玉米的生长及产量的重要因素，因此，提供一个能够调控玉米干旱胁迫的诱导型启动子对于解决玉米生长及产量的问题非常重要。

发明内容

本发明的目的是提供一种玉米干旱诱导型启动子ZmOMAp1730及应用，以解决上述现有技术存在的问题，通过实验验证ZmOMAp1730基因启动子响应干旱胁迫，并受干旱胁迫正向调控，该发现对于植物干旱调控以及进行抗旱育种具有重要意义。

为实现上述目的，本发明提供了如下方案：

本发明提供一种获得的玉米干旱诱导型启动子ZmOMAp1730，其核苷酸序列如SEQID NO：1中第1-1730位碱基序列所示。

本发明还提供一种扩增所述的玉米干旱诱导型启动子ZmOMAp1730的引物，其核苷酸序列如SEQ ID NO：2所示上游引物和SEQ ID NO：3所示下游引物。

优选的是，扩增程序为94℃预变性3min；98℃变性10s，68℃退火10s，72℃延伸2min，30个循环；72℃再延伸5min；4℃保持。

优选的是，扩增体系包括：5×PrimeSTAR Buffer 5.0μL、dNTP mix2.0μL、上游引物/下游引物各0.5μL、质粒0.2μL、高保真酶0.25μL，ddH₂O补充至25.0μL。

本发明还提供一种所述的玉米干旱诱导型启动子ZmOMAp1730、或所述的表达载体或所述的引物的应用，应用于如下(a)或(b)所示应用：

(a)在调控植物干旱胁迫中的应用；

(b)在植物抗旱育种中的应用。

优选的是，所述植物包括玉米、烟草以及拟南芥。

本发明公开了以下技术效果：

本发明通过植物启动子顺式作用元件分析网站，根据启动子中与干旱相关的顺式作用元件位置，在顺式作用元件附近设计引物，扩增不同长度的ZmOMA基因启动子5′端缺失序列，结果发现1730bp的启动子启动GUS表达载体的GUS活性最高；然后再将该序列的表达载体在烟草和拟南芥中进行功能验证，证实ZmOMAp1730基因启动子响应干旱胁迫，并受干旱胁迫正向调控。因此，本发明可以为植物干旱调控以及在抗旱育种方面提供理论基础和数据支撑。