[发明专利]用于检测福氏志贺菌2a和Xv血清型的LAMP引物及检测方法

权利要求书

1.用于检测福氏志贺菌2a和Xv血清型的LAMP引物，其特征在于，包括用于检测福氏志贺菌wzx基因的LAMP引物、用于检测福氏志贺菌gtrII基因的LAMP引物、用于检测福氏志贺菌gtrX基因的LAMP引物以及用于检测福氏志贺菌opt基因的LAMP引物；

用于检测福氏志贺菌wzx基因的LAMP引物包括：

外侧正向引物F3：5’-GTGCAGAATAAAATGCAACTT-3’；

外侧反向引物B3：5’-CTGGTTTAATATTTGCAAGAGTT-3’；

内侧正向引物FIP：5’-GGCGGTTGGATGACAGTAAGTAATATGCCCCCATAATATTTGACA-3’；

内侧反向引物BIP：5’-ACAAAAATGAACCCCCGAAATTTTTTCGATTTTAGTCTCTGCCTAT-3’；

环引物LF：5’-GGTGTATTTTGATCGATTTATAG-3’；

用于检测福氏志贺菌gtrII基因的LAMP引物包括：

外侧正向引物F3：5’-CGAAATGAGAAAAATATTCGTGA-3’；

外侧反向引物B3：5’-AGGAATCAGTAACCACTTGT-3’；

内侧正向引物FIP：5’-TGATAGCTTTGGTTAATAGCAGGTAAGTTCATGTTTATCTCTATCCCTCA-3’；

内侧反向引物BIP：5’-TGCAAGCGATATTAAATGGCTTGTTTTAAACCAGTGGGAGGATT-3’；

环引物LF：5’-TGAGATGTACTCGTTCGA-3’和环引物LB：5’-CAGCCATAGATAATATATATAACTTC-3’；

用于检测福氏志贺菌gtrX基因的LAMP引物包括：

外侧正向引物F3：5’-ATTGGCAAATGAAAGTGTTTG-3’；

外侧反向引物B3：5’-TGTCAGGAAGAGGGGTTA-3’；

内侧正向引物FIP：5’-GTTGGCAGTTGAGGAACAGAATCTTATTGTCGCATTTTCTATGG-3’；

内侧反向引物BIP：5’-ATGCGTTTGTTTGTTTCAATGCATACATTGCAATAAGGATGACTGAA-3’；

环引物LF：5’-CTGCCAGTTGAGGTTTTG-3’；

用于检测福氏志贺菌opt基因的LAMP引物包括：

外侧正向引物F3：5’-ATAGTCCTCCCTTCCGTAT-3’；

外侧反向引物B3：5’-AGAGGTTTAAGAGGACAGTT-3’；

内侧正向引物FIP：5’-ACTTGAGGAAAATGGTTACCATACATGATAGCATTAAACTCAATGGGTC-3’；

内侧反向引物BIP：5’-TCGATCTCTACTTTAGATGCTTGGCCCTCATCATATCAAATGACCG-3’；

环引物LB：5’-CAAGGCCAGAATTATCTT-3’。

2.含有权利要求1所述LAMP引物的检测试剂或试剂盒。

3.权利要求1所述LAMP引物或者权利要求2所述检测试剂或试剂盒在福氏志贺菌2a和Xv血清型检测中的应用，所述应用为非疾病诊断和治疗目的。

4.福氏志贺菌2a和Xv血清型检测方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)提取待测样品中的DNA；

2)以步骤1)中提取的DNA为模板，利用权利要求1所述LAMP引物进行LAMP扩增反应；

3)扩增结果判定；

所述方法为非疾病诊断和治疗目的。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，步骤2)所用25μL反应体系为：预混液12.5μL，引物混合物1.4μL，DNA模板1μL，无菌水10.1μL；

其中，所述引物混合物中，引物FIP和BIP各40pmol，引物F3和B3各10pmol，引物LF和/或LB各20pmol。