[发明专利]一种坚强芽孢杆菌及其应用

说明书

本发明涉及微生物技术领域，尤其涉及一种坚强芽孢杆菌及其应用。本发明从深圳市福田区红树林保护区表层10cm的土壤中分离得到一株坚强芽孢杆菌，命名为坚强芽孢杆菌MN36‑4。坚强芽孢杆菌MN36‑4具备较好的生产PHA的能力，PHA产量达到1.71g/L，其中PHB和PHV分别占比97.1％和2.9％，具有良好的工业化应用前景。

技术领域

本发明涉及微生物技术领域，尤其涉及一种坚强芽孢杆菌及其应用。

背景技术

现有技术中石油基塑料产品被大规模使用，但是由于石油基塑料的不可生物降解特性，大范围使用石油基塑料可能给自然生态系统和人类健康造成了严重的威胁。聚羟基脂肪酸酯(Polyhydroxyalkanoates， PHA)是由微生物合成的一类天然高分子基材料，具有可与合成塑料相媲美的理化特性，并且具有可生物降解和生物相容性，因此正成为替代合成塑料的重要替代品。

红树林是生长在热带、亚热带潮间带的木本植物群落，其土壤处于周期性遭海水浸淹的潮间带环境。红树林生态系统的微生物进化出了独特的生理生化特性，以适应这种特殊环境。研究表明红树林作为高盐、高碳、低营养的生境蕴含着丰富的产PHA微生物资源。因此挖掘红树林中能够利用廉价碳源生产功能各异的PHA微生物菌株，具有重要的工业应用价值。

发明内容

为了解决现有技术存在的问题，本发明提供坚强芽孢杆菌及其应用。

第一方面，本发明提供一种坚强芽孢杆菌(Cytobacillus firmus) MN36-4。本发明从深圳市福田区红树林保护区表层10cm的土壤中分离得到一株坚强芽孢杆菌，命名为MN36-4，并对其进行了保藏，保藏信息如下：

保藏单位名称：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号：CGMCC No.22298，保藏日期：2021年5月10号，分类命名：Cytobacillus firmus，保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，邮政编码：100101。

本发明对其进行了形态学观察、生理生化鉴定和16S rDNA序列 (16S rDNA序列如SEQ ID NO.1所示)，均和坚强芽孢杆菌的一致。

第二方面，本发明提供一种菌剂，包括所述坚强芽孢杆菌 (Cytobacillusfirmus)MN36-4或其发酵液。

进一步地，所述菌剂中PHA浓度达到1.71g/L以上。

更进一步，所述PHA中PHB和PHV分别占比97.1％和2.9％。

第三方面，本发明提供一种生产PHA的方法，包括：使用所述坚强芽孢杆菌(Cytobacillus firmus)MN36-4或所述菌剂进行发酵培养。

进一步地，所述发酵培养为：

在温度25～35℃的条件下，150～200r/min培养3～5天。

进一步地，所述发酵培养中使用的培养基为营养肉汤培养基、以葡萄糖为单一碳源的无机盐培养基或以丙酮酸钠为单一碳源的无机盐培养基中的一种或多种。

更进一步地，营养肉汤培养基的组分如下：

10g/L的蛋白胨，5g/L的牛肉膏，5g/L的NaCl；

以葡萄糖为单一碳源的无机盐培养基的组分如下：