[发明专利]复方小钻颗粒中三种活性成分含量同时测定的方法

说明书

本发明公开了一种HPLC法同时测定复方小钻颗粒中原儿茶酸、儿茶素、表儿茶素三种活性成分含量的方法，该方法采用的色谱条件如下：采用Kromasil C18(4.4x250mm，5μm)色谱柱；以乙腈‑0.3％磷酸梯度洗脱，流速为1.0ml·min^‑1，检测波长：280nm，进样量为10μl。在此色谱条件下，原儿茶酸、儿茶素、表儿茶素进样量分别在0.1～2.0μg(r＝0.9996)，0.3～6.0μg(r＝0.9997)，0.3～6.0μg(r＝0.9997)范围内呈现良好的线性关系，稳定性、重复性、精密度试验结果RSD值均小于3.0％，平均加样回收率分别为98.29％、97.79％、98.23％，RSD为1.72％、1.6％、2.25％。本方法简单、快速、准确、重现性好，可为全面评价和控制复方小钻颗粒的质量提供理论依据。

技术领域

本发明涉及一种中药新药复方小钻颗粒中活性成分的检测方法，具体的说是一种同时测定复方小钻颗粒中三种活性成分的方法，属于医药技术领域。

背景技术

中药新药复方小钻颗粒祛有活血通络、散瘀消肿之功效，由小钻、千斤拔、救必应、鸡血藤、飞龙掌血和一匹绸等6味药材组成，处方依据国医大师班秀文教授的经验方精简而来，临床治疗慢性盆腔炎症效果显著，是广西中医药大学第一附属医院临床治疗CPID的临床验方，在临床上应用效果显著，医学前景良好。

目前国内关于中药新药复方小钻颗粒制剂质量控制方面少有研究，为使制剂质量得到有效控制，因此选择原儿茶酸、儿茶素、表儿茶素为复方小钻颗粒的质量评价指标，为控制中药新药复方小钻颗粒质量提供科学依据。

本发明建立了同时测定中药新药复方小钻颗粒中原儿茶酸、儿茶素、表儿茶素三种成分含量的检测方法，实验结果表明，本法建立的HPLC同时测定制剂中多个不同指标成分的含量测定方法，简单快速、准确可靠，重复性及稳定性均较好，可作为该制剂的质量控制方法。

发明内容

本发明目的在于提供一种同时测定复方小钻颗粒中三种活性成分的方法的方法，该方法简单、稳定、重现性好，可用于该药品的质量控制。

本发明的目的是这样实现的：利用高效液相色谱检测的方法，同时测定制剂中处方药材主要成分原儿茶酸、儿茶素、表儿茶素含量，具体步骤如下：

(1)对照品溶液的制备：分别精密称取儿茶素、表儿茶素、原儿茶酸对照品10mg，用甲醇溶解，定容于10mL容量瓶，配成单一的对照品母液，备用。吸取适量儿茶素、表儿茶素、原儿茶酸母液于10mL容量瓶中，甲醇定容至刻度线，得到浓度为0.02mg/mL儿茶素、0.06mg/mL表儿茶素、0.06mg/mL原儿茶酸的混合对照品溶。

(2)供试品溶液的制备：精密称取复方小钻颗粒2g，精密加入甲醇45mL，超声处理25min，待其自然冷却后进行抽滤。滤渣用甲醇洗涤2次，每次5mL，合并原有供试品半成品滤液，水浴锅95℃蒸干溶剂，干膏完全转移至研钵中碾成粉末，用甲醇定容至10mL容量瓶中，使用0.22μm微孔滤膜过滤，经上述步骤即可得到复方小钻颗粒质量检验的供试品溶液。

(3)分离检测：将混合对照品溶液和供试品溶液分别注入高效液相色谱仪，采用Kromasil C18(4.4x250mm，5μm)色谱柱；以乙腈-0.3％磷酸梯度洗脱，流速为1.0ml·min^-1，检测波长：280nm，进样量为10μl。记录峰面积计算含量即可。

本发明具有以下优点和积极效果：

1、本发明所述方法简单、准确、重现性和稳定性好，可为全面评价和控制复方小钻颗粒质量提供理论基础和科学依据。