[发明专利]一种去甲肾上腺素的高灵敏荧光检测方法及试剂盒在审
申请号: | 202110715718.9 | 申请日: | 2021-06-24 |
公开(公告)号: | CN113514439A | 公开(公告)日: | 2021-10-19 |
发明(设计)人: | 刘玉菲;安佳;杨达;张国秀;胡永琴;刘国一 | 申请(专利权)人: | 重庆大学 |
主分类号: | G01N21/64 | 分类号: | G01N21/64;G01N21/01 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 400044 *** | 国省代码: | 重庆;50 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 去甲肾上腺素 灵敏 荧光 检测 方法 试剂盒 | ||
本发明公开了一种去甲肾上腺素的高灵敏荧光检测方法,包括以下步骤:S1:将乙二胺添加至缓冲液中,获得第一混合液;S2:在所述第一混合液中,加入去甲肾上腺素溶液得到第二混合液;S3:加热使所述第二混合液反应后得到第三混合液;S4:通过光谱仪收集所述第三混合液在390nm处的发射峰强度,并通过发射峰强度计算去甲肾上腺素的浓度。另一方面,本发明还提出一种用于去甲肾上腺素的高灵敏荧光检测的试剂盒:包括缓冲液、乙二胺,所述试剂盒通过所述去甲肾上腺素的高灵敏荧光检测方法实现对去甲肾上腺素的检测。
技术领域
本申请涉及化学检测领域,尤其涉及一种去甲肾上腺素的高灵敏荧光检测方法及试剂盒。
背景技术
在人体内,去甲肾上腺素(NE)与焦虑、压力、睡眠和记忆等一些生理状况密切相关。血浆和/或尿液中去甲肾上腺素及其代谢物的浓度被用作高血压、嗜铬细胞瘤和神经母细胞瘤等几种疾病的指标。有效的全身血管升压药物,如去甲肾上腺素可用于恢复可接受的平均动脉血压。因此,实现对去甲肾上腺素的高灵敏检测具有重要的临床意义。目前常用的去甲肾上腺素(NE)临床化学方法大多采用高效液相色谱法和电化学检测。但该方法的特异性不强,灵敏度不够且操作复杂。因此,迫切需要开发能够检测去甲肾上腺素的简单、选择性和灵敏的方法。
发明内容
基于以上问题,本发明提出了一种去甲肾上腺素的高灵敏荧光检测方法,包括以下步骤:
S1:将乙二胺添加至缓冲液中,获得第一混合液;
S2:在所述第一混合液中,加入去甲肾上腺素溶液得到第二混合液;
S3:加热使所述第二混合液反应后得到第三混合液;
S4:通过光谱仪收集所述第三混合液在390nm处的发射峰强度,并通过发射峰强度计算去甲肾上腺素的浓度。
在其中一个实施例中,所述缓冲液选自伯瑞坦-罗宾森、磷酸缓冲盐溶液、柠檬酸-柠檬酸钠缓冲溶液中的任意一种,所述缓冲液的pH值为7.0~12.0。
在其中一个实施例中,所述第一混合液中乙二胺的浓度为0.6M-2M。
在其中一个实施例中,步骤S3的加热温度为30℃-60℃。
在其中一个实施例中,步骤S3的加热时间不小于3分钟。
在其中一个实施例中,形成所述第一混合液之前,还包括步骤S1a:向所述缓冲液中加入参比物。
在其中一个实施例中,所述参比物为荧光金纳米团簇、荧光碳量子点、荧光硅量子点、荧光CdTe量子点中的至少一种,所述参比物在紫外光照下显蓝红色。
在其中一个实施例中,所述参比物在反应体系中的浓度为0.01mg/mL-1mg/mL。
这种检测方法简单高效,仅通过乙二胺在特定pH值缓冲液中形成的混合液即可实现对去甲肾上腺素的快速、高灵敏检测,成本低,效率高,具有广阔的应用前景。
另一方面,本发明还提出一种用于去甲肾上腺素的高灵敏荧光检测的试剂盒:包括:缓冲液、乙二胺,所述试剂盒通过权利要求1所述的去甲肾上腺素的高灵敏荧光检测方法实现对去甲肾上腺素的检测。
在其中一个实施例中,还包括参比物,所述参比物为荧光金纳米团簇、荧光碳量子点、荧光硅量子点、荧光CdTe量子点中的至少一种,所述参比物在紫外光照下显红色。
这种试剂盒仅通过乙二胺和缓冲液,再结合常用的光谱仪设备,即可实现对去甲肾上腺素的快速、高灵敏检测,成本低,效率高,具有广阔的应用前景。
附图说明
下面结合附图对本发明的具体实施方式作进一步详细的说明:
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