[发明专利]一种再生丝素蛋白结合光敏剂的纳米颗粒制备方法

权利要求书

1.一种再生丝素蛋白结合光敏剂的纳米颗粒制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）基于家蚕蚕茧脱胶提取丝素蛋白，制备再生丝素蛋白RSF溶液，包括以下步骤：先称取10g家蚕蚕茧置于1000ml碳酸钠溶液，煮沸脱胶30分钟，且每10分钟缓慢搅拌一下，用二次水反复冲洗2-3次进行纯化，再将脱胶好的丝素蛋白置于烘箱40℃过夜；90℃条件下，在CaCl₂/无水乙醇/二次水溶液中加入适量脱胶好的丝素蛋白，搅拌2-2.5小时使其充分溶解；用8层纱布过滤后，装入截留分子量Da=14000的透析袋透析3天左右；在9000rpm条件下离心10分钟,离心结束后，吸取上层溶液，将所得丝素蛋白溶液放入分子量为20000的聚乙二醇溶液中浓缩24小时，得到再生丝素蛋白RSF溶液；

（2）采用去溶剂法将光敏剂Ce6物理包埋在丝素蛋白中，制备载有Ce6的丝素蛋白纳米颗粒SFC NPs，包括以下步骤：在溶有Ce6的9ml丙酮溶液中，逐滴缓慢加入1ml再生丝素蛋白溶液，使其剧烈搅拌5-6分钟后，用细胞破碎仪超声30秒，期间每超声2秒停2秒，结束后常温搅拌过夜；随后，放入离心机调至12000rpm离心15分钟左右，收集沉淀并用二次水洗涤几次，最后将其分散于二次水中，得到载有Ce6的丝素蛋白纳米颗粒SFC NPs的溶液。

2.根据权利要求1所述的一种利用再生丝素蛋白结合光敏剂的纳米颗粒制备方法，其特征在于：所述步骤（1）中碳酸钠溶液中碳酸钠质量占比0.2%；所述步骤（1）中CaCl₂/无水乙醇/二次水溶液中CaCl₂、无水乙醇和二次水的摩尔比为1：2：8；所述步骤（1）聚乙二醇溶液中聚乙二醇质量占比8%；所述步骤（1）中再生丝素蛋白RSF溶液中RSF纳米颗粒的直径范围为100-140nm。

3.根据权利要求1所述的一种利用再生丝素蛋白结合光敏剂的纳米颗粒制备方法，其特征在于：所述步骤（2）中丙酮溶液中光敏剂Ce6浓度为140μg ml^-1-160 μg ml^-1；所述步骤（2）中再生丝素蛋白溶液的浓度为13 mg mL^-1-16 mg mL^-1；所述步骤（2）中SFC NPs纳米颗粒的直径范围为130-170nm。