[发明专利]一种辛辣蔬菜中毒死蜱、丙溴磷、涕灭威的快速检测方法

说明书

本发明属于食品安全检测技术领域，尤其为一种辛辣蔬菜中毒死蜱、丙溴磷、涕灭威的快速检测方法，使用固相净化柱对辛辣蔬菜进行样本前处理，通过固相净化小柱，将辛辣蔬菜中对胶体金检测卡显色影响较大的物质进行净化吸附，而待检测的农药残留物不受影响随着提取液透过净化小柱，收集净化后液体，结合胶体金卡方法进行检测。本发明样本前处理时间短，摒弃了传统使用有机试剂多次萃取，氮吹、除杂、复溶等工序，将原来的整个样本前处理时间从1.5小时减少至现在的25分钟内即可完成。同时减少了有机试剂的使用，对保护人员健康、减少环境污染等方面都有很大帮助。该检测试剂盒成本低、操作简便、快速，适合含辛辣物质蔬菜样本的现场快速检测。

技术领域

本发明涉及食品安全检测技术领域，具体为一种辛辣蔬菜中毒死蜱、丙溴磷、涕灭威的快速检测方法。

背景技术

农药残留是指农业生产中使用农药后一定时期内残留与生物体、农副产 品及环境中微量的农药原体、有毒代谢物、降解物和杂质的总称。目前GB检 测方法，通常为气相、高效液相或气质联用方法。其样本前处理大多为有机 相提取(如二氯甲烷、丙酮、乙腈等)然后用氮气吹干后复溶过固相萃取柱、 洗脱后仪器检测。该技术方法实验成本高、仪器昂贵、检测过程长、技术性 操作要求高，不满足基层人员大规模快速检测蔬果中农药残留的需求。

现有的基层快检农残方法主要有乙酰胆碱酯酶抑制法和基于免疫学抗原抗体的胶体金法。前者主要对有机磷和氨基甲酸酯类农药敏感，对其他种类如有机氯、有机氮、拟除虫菊酯、酰胺类等农药敏感性不佳。且检测灵敏度差，无法区分农药类型，易受样本基质干扰等诸多因素影响。近来，基于免疫学胶体金农残检测卡因其特异性强、灵敏度高、操作简便、价格低廉而越来越受到欢迎。

发明内容

(一)解决的技术问题

针对现有技术的不足，本发明提供了一种辛辣蔬菜中毒死蜱、丙溴磷、涕灭威的快速检测方法，解决了现有通常为气相、高效液相或气质联用检测农药残留方法实验成本高、仪器昂贵、检测过程长、技术性操作要求高，不满足基层人员大规模快速检测蔬果中农药残留的需求，以及乙酰胆碱酯酶抑制法和基于免疫学抗原抗体的胶体金法农药敏感性不佳、检测灵敏度差，无法区分农药类型，易受样本基质干扰等诸多因素影响的问题。

(二)技术方案

本发明为了实现上述目的具体采用以下技术方案：

一种辛辣蔬菜中毒死蜱、丙溴磷、涕灭威的快速检测方法，使用固相净化柱对辛辣蔬菜进行样本前处理，通过固相净化小柱，将辛辣蔬菜中对胶体金检测卡显色影响较大的物质进行净化吸附，而待检测的农药残留物不受影响随着提取液透过净化小柱，收集净化后液体，结合胶体金卡方法进行检测。

进一步的，所述辛辣蔬菜中对胶体金检测卡显色影响较大的物质包括辣椒素、蒜氨酸和硫氰类物质。

进一步的，所述胶体金卡中集合毒死蜱、丙溴磷、涕灭威三个项目胶体金检测卡于一体，为一张三联卡上实现。

进一步的，所述三联卡实现方式为：分别将毒死蜱抗体、丙溴磷抗体、涕灭威单克隆抗体标记胶体金，各自抗原包被NC膜(T线位置)，羊抗鼠二抗包被C线位置，对应项目各自组贴成胶体金三联卡。

进一步的，所述固相净化柱的柱管内含有两种柱填料，分别用三个筛板隔开，由上至下，第一层柱填料采用质量比为2:1的石墨化碳黑与弗罗里硅土，第二层柱填料为RPC(苯乙烯/二乙烯基苯)。

进一步的，所述提取液为pH8.0～9.0的0.05～0.2mol/L硼酸缓冲液或者Tris-Hcl缓冲液。

(三)有益效果

与现有技术相比，本发明提供了一种辛辣蔬菜中毒死蜱、丙溴磷、涕灭威的快速检测方法，具备以下有益效果：