[发明专利]一种基因在调控菌株对抑制剂耐受性中的应用

说明书

本发明涉及基因工程技术领域，特别涉及一种基因在调控菌株对抑制剂耐受性中的应用。该基因选自基因YJL120W、YJR130C、YJR131W、YJL078C中的一种或多种；抑制剂选自呋喃类抑制剂、弱酸类抑制剂、酚类抑制剂中的一种或几种。本发明基因是在SCRaMbLE重排的基础上，结合生物信息学分析和RT‑qPCR手段进行基因挖掘工作，得到了耐受性相关基因YJL120W、YJL078C、YJR130C和YJR131W，并对它们进行功能验证，最终发现基因YJL120W的过表达，基因YJL078C、YJR130C和YJR131W的删除能提升菌株耐受性。

技术领域

本发明涉及基因工程技术领域，特别涉及一种基因在调控菌株对抑制剂耐受性中的应用。

背景技术

菌种改造技术是利用遗传学、生物化学等原理，对目标菌种进行分子改造以及对应条件筛选，为生产提供优良菌种进而促进生产发展的一门技术。菌种改造技术目前主要包括基因突变(如诱变等)、基因重组(如杂交、原生质体融合、基因工程等)、基因直接进化(如易错PCR、DNA改组、外显子改组等)等方法。菌种生理耐受性的改造对生物炼制和生物经济的发展有着重要意义。

酵母与人们的生活息息相关，在酿酒、烘焙、生物燃料、污染治理、营养品、生物医药等领域中都起着至关重要的作用，是理想的工业菌株。提高酵母的耐受性，将大大降低工业发酵成本，提高发酵产量。

目前，有关酵母耐受性的工作涉及到酿酒酵母的耐受乙醇、耐高温、耐酸性、耐受雷帕霉素、耐碱性等工作，采用的手段包括适应性进化和SCRaMbLE重排技术等，并以此挖掘到ACE2、GLN3、YER161C等基因。对于新的可提高酵母耐受性的基因有待进一步挖掘。

发明内容

有鉴于此，本发明提供了一种基因在调控菌株对抑制剂耐受性中的应用。经功能验证，发现基因YJL120W的过表达，基因YJL078C、YJR130C和YJR131W的敲除能提升菌株耐受性。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了一种基因在调控菌株对抑制剂耐受性中的应用，该基因选自基因YJL120W、YJR130C、YJR131W、YJL078C中的一种或多种；

抑制剂选自呋喃类抑制剂、弱酸类抑制剂、酚类抑制剂中的一种或几种。

作为优选，呋喃类抑制剂为糠醛，弱酸类抑制剂为乙酸，酚类抑制剂为苯酚。

在本发明提供的具体实施例中，抑制剂为糠醛、乙酸、苯酚的混合物。

作为优选，菌株为酵母菌株。

在本发明提供的具体实施例中，菌株为酿酒酵母菌株。

在本发明中，基因YJL120W正调控菌株对抑制剂耐受性，基因YJR130C、YJR131W、YJL078C负调控菌株对抑制剂耐受性。

本发明还提供了一种提高菌株对抑制剂耐受性的方法，该方法包括如下一种或多种改造：

a)过表达基因YJL120W；

b)敲除基因YJR130C；

c)敲除基因YJR131W；

d)敲除基因YJL078C；

抑制剂选自呋喃类抑制剂、弱酸类抑制剂、酚类抑制剂中的一种或几种。

作为优选，呋喃类抑制剂为糠醛，弱酸类抑制剂为乙酸，酚类抑制剂为苯酚。

在本发明提供的具体实施例中，抑制剂为糠醛、乙酸、苯酚的混合物。

作为优选，菌株为酵母菌株。

在本发明提供的具体实施例中，菌株为酿酒酵母菌株。