[发明专利]一种mRNA剂型的骨关节炎药物制剂及其制备方法和应用

说明书

本发明提供了一种mRNA剂型的骨关节炎药物制剂及其制备方法和应用，属于骨关节炎治疗技术领域，所述骨关节炎药物制剂，包括活性成分mRNA，所述mRNA包括编码如SEQIDNo.1～SEQIDNo.4所示重组蛋白序列中的一种或几种。本发明提供的骨关节炎药物制剂制备方法简单、快速、活性成分表达量高、免疫原性低，能够快速高效促进骨关节软骨生长，从而达到治疗骨关节炎的目的。

技术领域

本发明属于骨关节炎治疗技术领域，尤其涉及一种mRNA剂型的骨关节炎药物制剂及其制备方法和应用。

背景技术

骨关节炎(OA)是一种退行性关节疾病，系由于增龄、肥胖、劳损、创伤、关节先天性异常、关节畸形等诸多因素引起的关节软骨退化损伤、关节边缘和软骨下骨反应性增生。该病多见于中老年人群，好发于负重关节及活动量较多的关节(如颈椎、腰椎、膝关节、髋关节等)。过度负重或使用这些关节，均可促进退行性变化的发生。临床表现为缓慢发展的关节疼痛、压痛、僵硬、关节肿胀、活动受限和关节畸形等。

目前，该病缺少有效的治疗手段。当前主要采用的治疗方法是减少关节的负重和过度的大幅度活动，以延缓病变的进程。肥胖患者应减轻体重，减少关节的负荷。下肢关节有病变时可用拐杖或手杖，以求减轻关节的负担。理疗及适当的锻炼可保持关节的活动范围，必要时可使用夹板支具及手杖等，对控制急性期症状有所帮助。消炎镇痛药物可减轻或控制症状，但应在评估患者风险因素后慎重使用且不宜长期服用。软骨保护剂如硫酸氨基葡萄糖具有缓解症状和改善功能的作用，同时长期服用可以延迟疾病的结构性进展。对晚期病例，在全身情况能耐受手术的条件下，行人工关节置换术，目前是为数不多的公认消除疼痛、矫正畸形、改善功能的有效方法。然而在不进行手术的情况下，尚无有效的治疗药物。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种mRNA剂型的骨关节炎药物制剂及其制备方法和应用；本发明提供的骨关节炎药物制剂包括具有刺激软骨再生的蛋白生长因子mRNA以及编码重组蛋白的信号肽的mRNA，将所述骨关节炎药物制剂导入靶细胞后能够促进软骨细胞的生长发育，弥补了药物有效治疗骨关节炎方法的空白；所述骨关节炎药物制剂的制备方法简单、快速、活性成分表达量高、免疫原性低，能够快速高效促进骨关节软骨生长，从而达到治疗骨关节炎的目的。

为了实现上述发明目的，本发明提供了以下技术方案：

本发明提供了一种mRNA剂型的骨关节炎药物制剂，包括活性成分mRNA，所述mRNA包括编码如SEQ ID No.1～SEQ ID No.4所示的重组蛋白的mRNA序列中的一种或几种。

优选的，所述mRNA的5’端连接帽子结构和5’UTR；所述mRNA的3’端连接3’UTR和多聚A尾。

优选的，所述mRNA的序列如SEQ ID No.5～SEQ ID No.12所示；其中SEQ ID No.5或SEQ ID No.6所示的mRNA序列编码SEQ ID No.1所示的重组蛋白；SEQ ID No.7或SEQ IDNo.8所示的mRNA序列编码SEQ ID No.2所示的重组蛋白；SEQ ID No.9或SEQ ID No.10所示的mRNA序列编码SEQ ID No.3所示的重组蛋白；SEQ ID No.11或SEQ ID No.12所示的mRNA序列编码SEQ ID No.4所示的重组蛋白。

优选的，所述骨关节炎药物制剂为液体制剂。

优选的，所述骨关节炎药物制剂为注射制剂。

优选的，所述活性成分mRNA在骨关节炎药物制剂中的浓度为200～2000μg/ml。

优选的，所述活性成分mRNA的溶剂为生理盐水。

本发明提供了所述的骨关节炎药物制剂的制备方法，包括以下步骤：

1)合成转录所述的骨关节炎药物制剂中的活性成分mRNA的DNA片段，并将所述DNA片段克隆至表达质粒获得重组质粒；