[发明专利]一种卷筒叶抗褐飞虱水稻恢复系的育种方法

权利要求书

1.一组特异分子标记片段，其特征在于，所述特异分子标记片段分别如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示；所述特异分子标记片段作为抗虫片段，用于在亲本“广恢998”、“恢复系R470”和“抗褐飞虱普通野生稻导入系BPHR96”的杂交后代中进行褐飞虱抗性鉴定。

2.扩增权利要求1所述的特异分子标记片段的分子标记引物对，其特征在于，所述分子标记片段SEQ ID NO.1对应的分子标记引物对如SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示；所述分子标记片段SEQ ID NO.2对应的分子标记引物对如SEQ ID NO.5和SEQ ID NO.6所示。

3.根据权利要求2所述的分子标记引物对，其特征在于，使用分子标记引物对SEQ IDNO.3和SEQ ID NO.4进行PCR扩增，扩增得到一条132bp的特异片段，使用分子标记引物对SEQ ID NO.5和SEQ ID NO.6进行PCR扩增，扩增得到一条98bp的特异片段，则表明分别获得抗性连锁基因；使用分子标记引物对SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4进行PCR扩增，扩增得到一条142bp的特异片段，使用分子标记引物对SEQ ID NO.5和SEQ ID NO.6进行PCR扩增，扩增得到一条113bp的特异片段，则表明分别获得感虫连锁基因；使用分子标记引物对SEQ IDNO.3和SEQ ID NO.4进行PCR扩增，扩增得到一条142bp和一条132bp的特异片段，使用分子标记引物对SEQ ID NO.5和SEQ ID NO.6进行PCR扩增，扩增得到一条113bp和一条98bp的特异片段，则表明分别获得杂合基因型。

4.权利要求2或3所述的分子标记引物对在水稻抗褐飞虱分子标记辅助育种中的应用，其特征在于，用于在亲本“广恢998”、“恢复系R470”和“抗褐飞虱普通野生稻导入系BPHR96”的杂交后代中进行褐飞虱抗性鉴定。

5.一种卷筒叶抗褐飞虱水稻恢复系的育种方法，其特征在于，包括如下步骤：

（1）以恢复系广恢998为母本，恢复系R470为父本杂交、自交，选择卷筒叶、株型紧凑、主要农艺性状优良的单株，一直至F4代；

（2）从F4株系中挑选茎秆粗壮的卷筒叶单株，取每个单株中的至少1个稻穗温汤杀雄，剪颖做母本，以抗褐飞虱普通野生稻导入系BPHR96为父本进行杂交获得F1，其余稻穗收种形成F5代；

（3）从F5代群体中挑选茎秆粗壮的卷筒叶单株为母本，方法同步骤2，一部分穗子杂交，一部分穗子收获种子形成F6，步骤2获得的F1单株为父本进行回交，获得BC1种子；

（4）种植BC1种子获得BC1F1，利用分子标记引物对SEQ ID NO.3-6对BC1F1单株进行标记分析，选取2个标记均为杂合基因型的单株作为父本；

（5）重复步骤3的方法，将F5中选单株剩余穗子收获的种子种植形成F6代群体，从中挑选茎秆粗壮的卷筒叶单株为母本，以步骤4挑选的单株作为父本杂交，获得BC2种子；

（6）种植BC2种子形成BC2F1，利用分子标记引物对SEQ ID NO.3-6筛选2个标记基因型均为杂合的单株作为父本；

（7）重复步骤3的方法，将F6中选单株剩余穗子收获的种子种植形成F7代群体，从中挑选茎秆粗壮的卷筒叶单株为母本，以步骤6挑选的单株作为父本杂交，获得BC3种子；

（8）种植BC3种子形成BC3F1，利用分子标记引物对SEQ ID NO.3-6筛选2个标记基因型均为杂合的单株作为父本；

（9）重复步骤3的方法，将F7中选单株剩余穗子收获的种子种植形成F8代群体，从中挑选茎秆粗壮的卷筒叶单株为母本，以步骤8挑选的单株作为父本杂交，获得BC4种子；

（10）种植BC4种子形成BC4F1，利用分子标记引物对SEQ ID NO.3-6筛选2个标记基因型均为杂合的单株作为父本；

（11）重复步骤3的方法，将F8中选单株剩余穗子收获的种子种植形成F9代群体，从中挑选茎秆粗壮的卷筒叶单株为母本，以步骤10挑选的单株作为父本杂交，获得BC5种子；

（12）种植BC5种子形成BC5F1，利用分子标记引物对SEQ ID NO.3-6筛选2个标记基因型均为杂合的单株作为父本；

（13）重复步骤3的方法，将F9中选单株剩余穗子收获的种子种植形成F10代群体，从中挑选茎秆粗壮的卷筒叶单株为母本，以步骤12挑选的单株作为父本杂交，获得BC6种子；

（14）种植BC6种子形成BC6F1，分单株收种，按株系种植形成BC6F2，利用分子标记引物对SEQ ID NO.3-6筛选2个标记均为抗性基因型的单株，分单株收种；

（15）将BC6F2代收获单株的种子BC6F3进行褐飞虱抗性鉴定，种植高抗褐飞虱的单株，选择主要农艺性状优良的单株与三系不育系进行测交，分单株收获相应的测交单株形成BC6F4代以及对应的测交种；

（16）按株系分小区种植BC6F4及对应的测交种，综合考察测交种小区农艺性状、结实率、产量优势，选取杂种优势强、结实率和产量高以及小区植株整齐度好的对应株系混合收种，同时根据相应株系测交种的褐飞虱抗性鉴定结果，最终选育出卷筒叶抗褐飞虱水稻恢复系。

6.根据权利要求5所述的卷筒叶抗褐飞虱水稻恢复系的育种方法，其特征在于，所述步骤（15）中三系不育系为天丰A。