[发明专利]一种藤黄酸层层自主装胶束的制备方法及其应用

权利要求书

1.一种藤黄酸层层自主装胶束的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

步骤1：称取10mg藤黄酸(GA)、称取2mg姜黄素、卵磷脂和Solutol HS 15各200mg，转移至圆底烧瓶中，加入50mL无水乙醇超声至完全溶解；

步骤2：使用旋转蒸发器将溶剂旋干形成一层薄膜，再加入6mL蒸馏水超声30分钟，形成的均匀体系为藤黄酸胶束(GA-M)；

步骤3：依次慢慢滴加2mL鱼精蛋白溶液(5mg/mL)、2mL透明质酸溶液(6mg/mL)后分散均匀，0.45μm过滤，即得透明质酸-鱼精蛋白-藤黄酸胶束(HA-PRM-GA-M)。

2.如权利要求1所述的藤黄酸层层自主装胶束的制备方法，其特征在于，藤黄酸胶束(GA-M)和透明质酸-鱼精蛋白-藤黄酸胶束(HA-PRM-GA-M)的粒径分布、zeta电位的测定步骤如下：利用0.45μm微孔过滤器对样品过滤，选择Malvern ZetasizerNano-ZS进行测定。

3.如权利要求1所述的藤黄酸层层自主装胶束的制备方法，其特征在于，透明质酸-鱼精蛋白-藤黄酸胶束(HA-PRM-GA-M)的形态学评价采用透射电子显微镜进行，透明质酸-鱼精蛋白-藤黄酸胶束(HA-PRM-GA-M)的包封率和载药量采用超滤离心法测定。

4.如权利要求1所述的藤黄酸层层自主装胶束的制备方法，其特征在于，胶束中藤黄酸的包封率和载药量选用超滤管和7000g离心力10min分离未包封的藤黄酸进行计算。

5.如权利要求1所述的藤黄酸层层自主装胶束的制备方法，其特征在于，胶束中的藤黄酸的体外溶出行为采用透析袋法测定。

6.如权利要求5所述的藤黄酸层层自主装胶束的制备方法，其特征在于，将2mL HA-PRM-GA-M转移到透析袋中，并将密封袋放置到100mL PBS溶液中，该溶液含有0.5％(v/v)吐温80，添加或不添加200单位/mL透明质酸酶。

7.如权利要求6所述的藤黄酸层层自主装胶束的制备方法，其特征在于，实验在37±0.2℃的恒温摇床中进行，并以100rpm持续振荡，在预定时间点，取适量的样品，并立即用等量的新鲜培养基代替，样品含量用高效液相色谱法测定。

8.如权利要求1所述的藤黄酸层层自主装胶束的制备方法，其特征在于，采用薄膜水化法同时制备包载藤黄酸与姜黄素的协同载药纳米胶束,两个药物成分比例为5:1。

9.如权利要求8所述的藤黄酸层层自主装胶束的制备方法制备的藤黄酸层层自主装胶束在抗肿瘤中的应用，藤黄酸和姜黄素联用组合在人肝癌细胞中显示出协同抗肿瘤作用。