[发明专利]喹啉噻唑啉酮衍生物Ro-3306在治疗β-冠状病毒感染中的应用

说明书

本发明涉及喹啉噻唑啉酮衍生物Ro‑3306在治疗β‑冠状病毒感染中的应用。本发明提供了Ro‑3306(式I)在制备药物中的用途，所述药物用于治疗β‑冠状病毒感染。Ro‑3306可以直接作用于TFEB蛋白液态凝聚体，在细胞间期提高TFEB的转录活性，促进溶酶体酸化，抑制β‑冠状病毒对溶酶体的碱化，进而抑制β‑冠状病毒的分泌，用于治疗β‑冠状病毒感染。

技术领域

本发明涉及医药领域，特别地涉及喹啉噻唑啉酮衍生物Ro-3306在治疗β-冠状病毒感染中的应用。

背景技术

β-冠状病毒是一类具有囊膜的正链RNA病毒，可以感染人和其他哺乳动物，引起呼吸道、肠道、肝脏和神经系统等疾病。与人类重大公共流行病相关的β-冠状病毒包括新型冠状病毒(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2，SARS-CoV-2)、严重急性呼吸道综合征冠状病毒 (severe acute respiratory syndromes coronavirus，SARS-CoV)和中东呼吸综合征冠状病毒(Middle East respiratory syndrome coronavirus，MERS-CoV)，分别引起新冠肺炎、非典型性肺炎和中东呼吸综合征等流行病。β-冠状病毒感染目前仍然缺乏临床有效的治疗药物；另外由于RNA病毒极易突变，利用接种疫苗等群体免疫手段，无法彻底根除β-冠状病毒感染，只能在一定程度上抑制相关流行病的爆发，因此β-冠状病毒已经成为严重威胁全世界公共卫生安全的感染源。

β-冠状病毒对宿主细胞的感染过程包括入侵、复制、包装、分泌四个步骤，理论上阻断其中任意一个过程都可以抑制病毒的感染效率。β-冠状病毒的复制和分泌与溶酶体通路密切相关，一些复制关键蛋白需要通过溶酶体中的蛋白酶进行剪切，以转化为活性状态，进而催化下游的复制过程；组装好的β-冠状病毒则劫持并碱化溶酶体，利用溶酶体的分泌途径进行细胞外分泌，从而可以开始下一轮的感染过程(参考文献1，β-coronaviruses uselysosomes for egress instead of the biosynthetic secretory pathway. Cell,183:1520-1535.(2020))。溶酶体的酸化程度对于溶酶体的降解活性和分泌途径至关重要。降解溶酶体中通常是酸性的环境(内部pH值可以低至 5以下)，其中的各种水解酶(如蛋白酶、酯酶、糖苷酶等)在酸性环境下处于活性状态，在碱性条件下活性被抑制，因此溶酶体酸化有利于提高其降解活性。而溶酶体碱化(去酸化)，则被认为是其进行分泌途径的先决条件。碱化的分泌溶酶体会向细胞膜附近移动，并最终与细胞膜融合，将其中包裹的物质分泌至细胞外。β-冠状病毒感染宿主后，先利用酸性的降解溶酶体激活其关键蛋白，进行病毒复制和组装的过程；当宿主细胞中的病毒复制达到一定程度时，多种病毒蛋白会碱化溶酶体，以促进其携带病毒颗粒进行分泌。

在病毒感染宿主细胞后，宿主细胞同样会利用溶酶体等通路抵御病原物入侵，并激活免疫系统。首先，入侵的病毒会被细胞自噬通路识别，并尝试将其运输至溶酶体进行降解。其次，通过各种方式进入溶酶体的病毒，其蛋白会被溶酶体切割成病毒来源的抗原小肽，宿主细胞会利用溶酶体的分泌功能将这些抗原小肽呈递至细胞膜上的MHC复合物，以激活免疫系统对感染宿主细胞的识别。但与此同时，病毒通过碱化溶酶体令其丧失降解活性，又可以抑制溶酶体对病毒蛋白的过度剪切，以产生病毒来源的抗原小肽，最终抑制病毒抗原在宿主细胞表面的展示和免疫系统对感染细胞的识别。因此，β-冠状病毒对宿主细胞的感染过程，是一个竞争性的互作过程，互作的失衡，最终只有宿主清除病毒，或β-冠状病毒的大量感染扩散两种结果。

溶酶体通路的功能对于β-冠状病毒感染宿主，以及宿主对病毒的抵御至关重要。目前已有一些药物，如羟氯喹等，通过抑制溶酶体酸化和降解功能，在细胞系水平干扰病毒的复制和感染过程。但由于溶酶体的酸化和降解活性对于正常细胞存活是必不可少的，因此在临床使用上，羟氯喹本身具有极大的毒副作用，在宿主可耐受的药物浓度下，对新冠病毒感染的临床治疗已经宣告失败。在本发明中，发明人反其道而行，发现利用药物促进溶酶体的酸化和降解功能，可以抑制β-冠状病毒的分泌，以达到抑制β-冠状病毒感染的目的。