[发明专利]一种草地贪夜蛾SoxC基因、其编码蛋白、载体、菌株及应用

说明书

本发明公开了一种草地贪夜蛾SoxC基因、其编码蛋白、载体、菌株及应用。本发明草地贪夜蛾SoxC基因，其碱基序列如SEQ ID NO.1所示。本发明首次在草地贪夜蛾中克隆出SoxC基因，并获得了草地贪夜蛾SoxC基因的DNA全长序列，SoxC基因的蛋白序列，并且将原核表达纯化的草地贪夜蛾SoxC基因蛋白制备了多克隆抗体，可特异性地从草地贪夜蛾体内检测出SoxC基因的蛋白。本发明纯化出的草地贪夜蛾SoxC基因多可隆抗体可用于草地贪夜蛾不同发育时期其体内SoxC基因蛋白表达含量的检测，明确该基因的表达动态，预测该基因的重要生物学功能；同时本发明的SoxC基因在控制草地贪夜蛾羽化中起到重要作用。

技术领域

本发明涉及农业科学技术领域，具体涉及一种草地贪夜蛾SoxC基因、其编码蛋白、载体、菌株及应用。

背景技术

草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda属鳞翅目夜蛾科，别名秋粘虫。杂食性，是玉米、高粱、小麦、大麦、牧草等多种农作物上的重要害虫。原产于南美洲与北美洲的南部与中部，目前该害虫已经在逐渐传播至中国多个省区市。草地贪夜蛾对农业生产具有重大威胁。已经报道该害虫对多种药剂已经有较高的抗药性，目前农业生产上的草地贪夜蛾防控面临严峻挑战，急待开拓减少化学农药使用的新型无公害防控手段。

昆虫SoxC基因是一个重要调控基因，它是蜕皮激素信号早期响应基因，参与蜕皮激素信号的下游传导。以昆虫变态发育调控关键基因为靶标防治昆虫是一种害虫防控新兴方法。目前草地贪夜蛾中SoxC基因尚未有研究报道，基因的作用也不清楚，从体外获得的重组SoxC基因也无研究。因此克隆草地贪夜蛾SoxC基因基因序列并且获得体外重组蛋白并制备多克隆抗体，对深入研究该基因的功能并进一步开发其抑制剂有着重要的理论意义和实践作用。

发明内容

发明目的：针对现有技术中存在的不足，本发明的目的是提供一种草地贪夜蛾SoxC基因(Sf-SoxC)的DNA序列，该基因在昆虫羽化过程中起到重要作用，通过将草地贪夜蛾SoxC基因敲除，草地贪夜蛾羽化异常并最终死亡，达到防治草地贪夜蛾的作用。

本发明还提供了一种Sf-SoxC蛋白、含编码Sf-SoxC的DNA序列的重组表达载体和转基因重组菌株以及应用。

技术方案：为了实现上述目的，本发明所述一种草地贪夜蛾SoxC基因的DNA序列，其DNA序列如SEQ ID NO.1所示。

本发明所述草地贪夜蛾SoxC基因其编码的蛋白，其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。

本发明所述含有用于编码草地贪夜蛾SoxC基因的DNA序列的重组表达载体。

其中，将所述DNA序列插入到大肠杆菌表达载体中得到的表达草地贪夜蛾SoxC基因的重组表达载体。

作为优选，所述大肠杆菌表达载体为pET32a。

本发明所述的含草地贪夜蛾SoxC基因的DNA序列的转基因重组菌株。

其中，所述重组菌株是将重组表达载体导入大肠杆菌中，筛选得到转基因重组菌株。

作为优选，所述的大肠杆菌为BL21(DE3)。

本发明所述的草地贪夜蛾SoxC基因的DNA序列在生产草地贪夜蛾SoxC基因原核表达蛋白中的应用。

其中，所述草地贪夜蛾SoxC基因原核表达蛋白的制备，包括以下步骤：

(1)草地贪夜蛾SoxC基因基因的扩增；

(2)草地贪夜蛾SoxC基因基因原核表达载体构建；

(3)草地贪夜蛾SoxC基因原核表达蛋白的变性和复性；

(4)草地贪夜蛾SoxC基因原核表达蛋白的纯化即得到草地贪夜蛾SoxC基因原核表达蛋白。