[发明专利]一种凤尾草抑菌成分的制备、分离及鉴定方法

说明书

本发明公开了一种凤尾草抑菌成分的制备、分离及鉴定方法，该制备方法通过合理控制料液比、温度、及时间，并选择适合的提取液，能快速有效提取凤尾草中的抑菌成分，提高后续研究的效率和可靠性。采用薄层色谱法，通过筛选出适合的展开剂，能将由凤尾草制成的抑菌液中的各成分在薄层板上展开形成斑点而获得薄层色谱图谱，容易借助显色剂或紫外光观察到分离出的斑点，并确定该抑菌液中抑菌成分含量高低，为建立抑菌成分与抑菌效果关联性的快速鉴别方法提供基础。通过抑菌圈实验及薄层色谱法建立薄层色谱图谱，可以快速鉴别凤尾草中的活性抑菌成分含量高低，从而筛选出优质的凤尾草。

技术领域

本发明涉及凤尾草加工领域，特别是涉及一种凤尾草抑菌成分的制备、分离及鉴定方法。

背景技术

凤尾草是凤尾蕨科凤尾蕨属植物，主要以其叶形和生态环境来命名，如金鸡尾、鸡脚草、井栏边草等，喜生长在荫蔽、湿润、温暖处，也耐旱，在南方冬季，石缝中生长的植株即使经—二月的干旱，也不会完全枯死；凤尾草以全草入药，性凉，味微苦，归肝、肾、大肠经，具有清热利湿、凉血止血、消肿解毒等功效，用于治疗痢疾、肠炎、黄疸型肝炎、吐血、便血、尿血等病症，具有明显的抑菌效果。

虽然大多数不同来源的凤尾草的成分类别基本相同，但是因为产地、采摘季节等因素的差异，其抑菌成分的含量也不同，所以不同来源的凤尾草的质量不同，临床疗效也有差异。

现有的凤尾草抗菌活性研究中，还没有一种关于抑菌成分与抑菌效果关联性的快速鉴别方法，不能快速的筛查出优质凤尾草。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术中的上述缺陷，提供了一种凤尾草抑菌成分的制备、分离及鉴定方法，通过研究不同来源凤尾草的薄层色谱图谱和抑菌圈试验，初步建立一种能够快速鉴定优质凤尾草的薄层色谱图谱，为日后合理开发凤尾草资源提供科学依据。

为实现上述目的，本发明提供了一种凤尾草抑菌成分的制备方法，包括以下步骤：

S1.凤尾草混合提取液的制备：将凤尾草去除杂质并清洗干净后，干燥粉碎，制成凤尾草粉末，称取8～12g凤尾草粉末并与体积浓度为70％以上的乙醇按料液比为1：5～6g.mL^-1的比例混合均匀后浸泡30～40min，再在45～55℃下加热回流提取0.5～1.5h，冷却后获得凤尾草混合提取液；

S2.抑菌液的制备：将步骤S1中的凤尾草混合提取液过滤得滤液，将滤液蒸干后取残渣，向残渣中加20～30mL水溶散后，加入20～30mL乙酸乙酯振摇后用分液漏斗进行分离，取上清液，然后在水浴中蒸干获得料渣，将料渣用1～1.5mL无水乙醇溶解，即获得含有凤尾草抑菌成分的抑菌液，将该抑菌液在3～6℃条件下冷藏保存。

作为本发明的进一步改进，凤尾草抑菌成分的制备方法，包括以下步骤：

S1.凤尾草混合提取液的制备：将凤尾草去除杂质并清洗干净后，干燥粉碎，制成凤尾草粉末，称取10g凤尾草粉末并与体积浓度为70％的乙醇按料液比为1∶5g.mL^-1的比例混合均匀后浸泡30min，再在50℃下加热回流提取1h，冷却后获得凤尾草混合提取液；

S2.抑菌液的制备：将步骤S1中的凤尾草混合提取液过滤得滤液，将滤液蒸干后取残渣，向残渣中加20mL水溶散后，加入20mL乙酸乙酯振摇后用分液漏斗进行分离，取上清液，然后在水浴中蒸干获得料渣，将料渣用1mL无水乙醇溶解，即获得含有凤尾草抑菌成分的抑菌液，将该抑菌液在4℃条件下冷藏保存。

上述凤尾草抑菌成分的分离方法，包括以下步骤：