[发明专利]一种蚕蛹肽及其制备和应用

权利要求书

1.一种蚕蛹肽的制备方法，其特征在于，以蚕蛹为原料，将蚕蛹经脱脂 后采用碱溶酸沉法获得蚕蛹蛋白粉，然后使用纳豆菌液态发酵获得；具体操作如下：纳豆菌种子液以1%-7％(v/v)的接种量接种至发酵培养基中，初始 pH 值 5-9，并置于 30-45℃温度下进行振荡培养，培养 24-40h 后终止发酵，5000- 9000r/min 和 4℃条件下离心 10-30min 以除去菌体沉淀和未利用的蚕蛹蛋白残渣，取上清液用 0.22-0.45μm 微孔滤膜过滤，并将其冷冻干燥，即得蚕蛹肽； 所述的发酵培养基按以下步骤制备：称取蚕蛹蛋白粉、葡萄糖、磷酸二氢 钾、磷酸氢二钾、硫酸镁，加入蒸馏水配置成含蚕蛹蛋白粉 1%-5％(m/v)，葡 萄糖1％(m/v)、磷酸二氢钾0.1％(m/v)、磷酸氢二钾0.25％(m/v)、硫酸镁 0.5％(m/v)的悬浊液，放入 121℃ 高压灭菌锅灭菌 20min。

2.根据权利要求 1所述蚕蛹肽的制备方法，其特征在于，所述的脱脂按以下步骤进行：将蚕蛹匀浆后冻干，然后过 80目筛，取蚕蛹粉置于7-9 倍体积的正己烷中，40-50℃条件下磁力搅拌3-5h，离心弃上清液，通风橱晾干， 即为脱脂蚕蛹粉。

3. 根据权利要求1所述蚕蛹肽的制备方法，其特征在于，所述的碱溶酸沉法按以下步骤进行：将脱脂蚕蛹粉和蒸馏水配制成 5%-15% (m/v )的悬浊液， 用 1mol/L NaOH 调pH至10.0，40-50℃搅拌 3-5h，5000-9000r/min 离心处理 10-30min，收集上层清液用 1mol/L HCl 调 pH 至4.0，再5000-9000r/min 离心处理 10-30min ，收集沉淀，然后取沉淀用蒸馏水复水脱盐，冷冻干燥，即为蚕蛹蛋白粉。

4. 根据权利要求1 所述蚕蛹肽的制备方法，其特征在于，所述的纳豆菌液态发酵按以下步骤进行：取纳豆菌接入种子培养基，放入 37℃、120-200 r/min 摇床振荡培养 6-34h，制得 10⁷ -10⁸ CFU/mL 的种子液，种子液以1%-7％ (v/v)的接种量接种至发酵培养基中，初始pH值 5-9，并置于30-45℃温度下进行振荡培养，培养 24-40h后终止发酵，5000-9000r/min 和 4℃条件下离心 10-30min 以除去菌体沉淀和未利用的蚕蛹蛋白残渣，取上清液用 0.22- 0.45μm 微孔滤膜过滤，并将其冷冻干燥，即得蚕蛹肽。

5.权利要求1-4任一项权利要求所述蚕蛹肽的制备方法制备出的蚕蛹肽在制备治疗炎症性疾病药物上的应用。