[发明专利]一种抗体及其在预防、诊断、治疗新型冠状病毒肺炎的药物、试剂中的应用

说明书

本发明提供了一种抗体，其特征在于：所述抗体包括第一CDR3，所述第一CDR3序列为为抗体重链CDR3序列SEQ ID NO.1或SEQ ID NO.2或其功能性变体。进一步的，上述抗体，还包括第二CDR3，所述第二CDR3序列为抗体轻链CDR3序列SEQ ID NO.3或其功能性变体。本发明提供的新型冠状病毒抗体是全人源中和抗体，具有高效体外中和新型冠状病毒活性的新型冠状病毒的特性。

技术领域

本发明涉及医学生物抗体技术领域，主要涉及抗体，具体涉及该抗体作为新型冠状病毒中和抗体的应用，尤其是在新型冠状病毒变异株中和抗体的应用。

背景技术

新型冠状病毒即严重急性呼吸综合征冠状病毒2(serve acute respiratorysyndrome coronavirus 2，SARS-CoV-2)，该病毒与2003年的重症急性呼吸综合征冠状病毒(Severe Acute Respiratory Syndrome,SARS-CoV)以及2012年的中东呼吸综合征冠状病毒(Middle East Respiratory Syndrome Coronavirus,MERS-CoV)同属于冠状病毒科β属，同时该病毒也是目前已知的第七个人冠状病毒。人感染SARS-CoV-2后，以发热、乏力、干咳为主要表现，少数患者伴有鼻塞、流涕、腹泻等症状。老年人及具有慢性疾病或免疫力低的人群很容易被感染，并有较高的几率发展为急性呼吸窘迫综合征、脓毒症休克、难以纠正的代谢性酸中毒、出凝血功能障碍甚至死亡。此外，也有部分感染病例为儿童和婴幼儿，目前发现的最小患者为3个月月龄。此外，值得警惕的是部分重型和危重型患者病程中可为中低热甚至无明显发热症状，这些病例因缺乏明显的特异性临床表现，明显增加了临床的诊断难度和病毒传播速度。

研发特异有效的抗体药物是病毒性传染病防治的重要策略，中和抗体特异性强、亲和力高，能够快速中和冠状病毒，既可以在病原体暴露后给药，并在短时间内发挥疗效，也可以用作有效的预防性药物，是重大传染病防控体系中不可替代的核心药物之一。单克隆中和抗体药物开发可以精准靶向新冠病毒的抗原表位，被认为是具有治疗和预防潜力的特异性抗病毒疗法，而全人源抗体已逐渐成为抗体药物研发的首要选择。

据统计，国内主要有约20家高校、科研院所和企业，通过单细胞测序技术、抗体文库展示技术、杂交瘤融合技术等3条主要技术路线开展新冠肺炎中和抗体的研究工作，但当前尚未见相关抗体获批上市的报道。

单细胞测序技术主要是利用分离康复者血清中的B细胞或经抗原免疫后的人源化抗体转基因小鼠B细胞进行单细胞测序，获得特异性的全人单克隆抗体基因，用于后续制备全人源基因工程抗体。但该技术在单个B细胞的分离和PCR扩增过程中难度较大，不易获得高中和活性的抗体。

抗体文库展示技术主要是将外源肽段、基因等和噬菌体衣壳蛋白融合展示于噬菌体表面，进行高通量筛选及富集，获得特异性的全人单克隆抗体基因，用于后续制备全人源基因工程抗体。但由于该技术是以原核表达系统为基础，表达的抗体在氨基酸修饰、蛋白糖基化等方面存在一定缺陷，因此，近年来该技术已逐渐被人源化抗体转基因小鼠所替代。

杂交瘤融合技术主要是分离经抗原免疫后的人源化抗体转基因小鼠脾脏淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞进行融合，筛选获得特异性的全人单克隆抗体基因，构建并筛选分泌高活性抗体的细胞株，制备全人源基因工程抗体。目前，该技术是制备全人抗体药物最主流的技术，FDA批准的32款全人源抗体中，有23个(＞70％)来源于人源化抗体转基因小鼠，但由于人源化抗体转基因小鼠这一核心资源一直被国外少数几家公司垄断，且几乎不对外授权使用该小鼠，导致国内无法大范围应用。而且，从抗体的规模化应用来讲，病毒中和效果以及生产效率和成本都不能说理想，尚待解决。

新型冠状病毒在传播过程中存在不断变异的情况，但抗体的识别位点通常是由几个氨基酸，从而常导致前期中和抗体对流行变异株失效的情况，因此为了应对当前流行的变异株，需要更多针对性好、活性强的中和抗体。

发明内容