[发明专利]一种检测抗乌头酸水合酶-IgG抗体的检测试剂盒

说明书

本发明提供一种检测抗乌头酸水合酶‑IgG抗体的检测试剂盒，由aconitate hydratase(乌头酸水合酶)抗原蛋白，标记抗体液，包被乌头酸水合酶抗原的固相载体、样本稀释液，抗体和抗原稀释液，底物显色液，洗涤液，终止液，标准品，阳性和阴性质控品组成。本发明通过被检测血清样本与靶抗原aconitate hydratase多肽或其结合片段相接触，发生免疫反应，形成抗原抗体复合物，通过对形成的抗原抗体复合物进行抗乌头酸水合酶‑IgG自身抗体的检测。本发明首次鉴定了针对抗乌头酸水合酶‑IgG抗体，为国内外针对与抗乌头酸水合酶‑IgG抗体有关的自身免疫性肾病综合征的鉴别提供一种较好的检测方法。

技术领域

本发明属于生物医学技术领域，涉及一种检测抗乌头酸水合酶-IgG抗体的检测试剂盒。

背景技术

原发性肾病综合征(primary nephrotic syndrome,PNS)是多种因素引起肾小球基底膜通透性增加，进而血浆蛋白滤出增多，从尿液中丢失，并由此造成一系列病理改变的临床综合症。PNS是儿童常见的肾小球疾病，根据报道其年发病率为1.15～16.9/10,0000。病理类型表现为微小病变性肾病综合征(minimal change nephrotic syndrome,MCNS)是其中最常见的，依据PNS对于激素治疗的反应效果，分为激素敏感型(SSNS)、激素依赖型(SDNS)、激素耐药型(SRNS)。尽管绝大多数患儿对激素治疗反应敏感，预后良好，但仍有10％～20％的患儿对激素治疗的反应为依赖或耐药，若不进行其他药物干预治疗，可进展为肾小球硬化，最终进展为终末期肾病，严重影响患儿健康，家庭及社会难以承担沉重的经济负担。且该病的发病机制目前尚不十分清楚。PNS其临床症状通常表现为水肿、大量蛋白尿、低蛋白血症以及高脂血症等，然而引起这些临床表现的病因非常复杂，给明确PNS的诊断带来困难。因此，若能够寻找到引起PNS确切的病因，那么就能够在病因上对PNS进行尽早诊断，从而尽早干预与治疗，这将具有重要的临床意义。

目前，临床上给予激素和免疫抑制剂进行治疗的绝大多数PNS患儿病情能有所好转，间接地提示了PNS与患者的自身免疫存在密切的联系。众所周知，B淋巴细胞在体液免疫中发挥着最为重要的作用，然而PNS患儿肾脏的局部在过去数年间缺乏抗体的沉积，因此忽视了B淋巴细胞介导的体液免疫在PNS疾病中的作用。近年来的研究发现，在复发的激素敏感型肾病综合征患者中发现外周血中的B细胞的数量显著增加，被活化的B细胞在激素依赖型肾病综合征患者体内大量增加，然而对于处在缓解期的激素依赖型肾病综合征患者体内，其B细胞数量明显下降，提示B淋巴细胞功能异常在PNS中扮演着重要的作用。近些年，全球多地的研究发现，利用特异性针对CD20+B细胞的利妥昔单抗治疗儿童难治性肾病综合征中取得了显著的治疗效果。然而利用利妥昔单抗治疗SDNS的过程中发现，其清除B细胞的功效能维持5个月左右，但是在6，7个月的时候，由于B细胞数量回升患者的病情随即复发。由此提示PNS患者体内发生病理性的B细胞克隆，如果可以鉴别和精准的清除这些病理性的B细胞克隆，那么对于PNS病情的恢复是有利的，同样也减少了利用利妥昔单抗等方法无差别的清除B细胞造成体液免疫缺陷的风险。

然而，迄今为止，PNS患儿体内病理性B细胞针对的靶抗原仍然不是很清楚。从病理特征上来说，微小病变型肾病或局灶节段性肾小球硬化被认为是由于足细胞功能丧失或改变，导致大量蛋白尿的足细胞病。足细胞为肾脏肾小球上皮细胞，附着在肾小球的基底膜的外侧。它是阻止蛋白质丢失的最后屏障，足细胞损伤通常会引起大量的蛋白尿。