[发明专利]T细胞反应性平台

权利要求书

1.可吞噬颗粒在制备用于测定抗原特异性T细胞活化的产品中的用途，包括以下步骤：

a.提供具有与其紧密缔合的候选抗原多肽的可吞噬颗粒，其中与多肽缔合的颗粒已被进行变性洗涤，导致内毒素水平足够低，从而不干扰后续步骤；

b.提供活的抗原呈递细胞；

c.在允许抗原呈递细胞吞噬颗粒的条件下将洗涤的颗粒与抗原呈递细胞体外接触；

d.提供待分析的T细胞样品，其包含活的T细胞；

e.在允许T细胞响应于由抗原呈递细胞呈递的抗原而特异性活化的条件下，将T细胞样品与在已和颗粒体外接触的抗原呈递细胞接触；和

f.确定T细胞样品中T细胞活化的程度。

2.根据权利要求1所述的用途，其中所述用途进一步包括步骤(a’)，其使候选多肽与可吞噬颗粒紧密缔合，和/或步骤(a”)，其使与颗粒缔合的候选抗原经历变性洗涤。

3.可吞噬颗粒在制备用于测定抗原特异性T细胞活化的产品中的用途，包括以下步骤：

a.提供可吞噬颗粒；

b.将候选抗原多肽与颗粒紧密缔合；

c.对与多肽缔合的颗粒进行变性洗涤，导致内毒素水平足够低，从而不干扰随后的步骤；

d.提供活的抗原呈递细胞；

e.在允许抗原呈递细胞吞噬颗粒的条件下，使洗涤的颗粒与抗原呈递细胞体外接触；

f.提供待分析的T细胞样品，其包含活的T细胞；

g.在允许T细胞响应于由抗原呈递细胞呈递的抗原而特异性活化的条件下，使T细胞样品和与颗粒接触过的抗原呈递细胞体外接触；和

h.确定T细胞样品中T细胞活化的程度。

4.根据前述权利要求中任一项的用途，还包括将T细胞活化程度与相关参照比较的步骤，其中，与参照相比，样品中更高程度的T细胞活化表明候选抗原导致样品中抗原特异性T细胞活化。

5.根据前述权利要求中任一项的用途，其中确定T细胞样品中T细胞活化的程度涉及确定样品中活化的T细胞的分数。

6.根据前述权利要求中任一项的用途，其中针对相同的T细胞样品测定几种候选抗原。

7.根据前述权利要求中任一项的用途，其中针对相同的T细胞样品测定至少10种候选抗原。

8.根据前述权利要求中任一项的用途，其中所述颗粒具有的最大尺寸为小于5.6μm、优选小于4μm、更优选小于3μm、甚至更优选在0.5-2μm之间或最优选约1μm。

9.根据权利要求8的用途，其中所述颗粒基本上是球形的。

10.根据前述权利要求中任一项的用途，其中所述变性洗涤涉及使所述与多肽缔合的颗粒经受高pH，例如至少pH 13，更优选至少pH 14，最优选至少pH 14.3。

11.根据前述权利要求中任一项的用途，其中所述变性洗涤涉及使所述与多肽缔合的颗粒经受低pH。

12.根据前述权利要求中任一项的用途，其中所述变性洗涤涉及使所述与多肽缔合的颗粒经受高温，如至少90℃，更优选至少92℃，最优选至少95℃。

13.根据前述权利要求中任一项的用途，其中所述变性洗涤涉及使所述与多肽缔合的颗粒经受变性剂，如足够浓度的尿素或盐酸胍，所述浓度为例如至少5M、6M、7M或8M。

14.根据前述权利要求中任一项的用途，其中所述变性洗涤导致所述抗原中的内毒素的量使得在所述T细胞活化测定中，内毒素的最终浓度小于100pg/ml，优选小于50pg/ml，更优选小于25pg/ml，且最优选小于10pg/ml。

15.根据前述权利要求中任一项的用途，其中所述颗粒具有顺磁性。