[发明专利]一种液相色谱法测定饲料中六种抗球虫药物含量的方法

权利要求书

1.一种液相色谱法测定饲料中六种抗球虫药物含量的方法，其特征在于：包括以下步骤：

(1)准确称取1±0.01g研磨均匀的饲料于15mL聚丙烯离心管中，加入适量混合标准工作液，涡旋混匀后室温静置30min，待提取；

(2)向离心管中加入5mL 0.1％三氯乙酸乙腈溶液，充分涡旋，超声10min，震荡30min，10000rpm离心10min，将上清液转移至另一个离心管中，残渣用5mL 0.1％三氯乙酸乙腈溶液重复提取一次，混匀离心后合并上清液待净化；

(3)取1mL上述溶液转移至提前装有50mg PSA填料的2mL塑料离心管中，涡旋1min，10000rpm的条件下离心10min；

(4)取净化后的1mL溶液至玻璃管中吹干，用甲醇与5mmol/L乙酸铵水溶液体积比为8:2的溶液复溶，经0.22μm滤膜待检测；

(5)使用Agilent 1260高效液相色谱系统进行分析，色谱分离选用Agilent Extend-C18色谱柱作为分析柱；流动相A为甲醇，B为5mmol/L乙酸铵水溶液，梯度洗脱；25℃；检测波长270nm和340nm，流速1mL/min；进样量20μL；

所述乙酸铵水溶液含0.5％甲酸；

所述Agilent Extend-C18色谱柱：250mm×4.6mm i.d.,5μm；

所述梯度洗脱：A：甲醇，B：5mmol乙酸铵水溶液-含0.5％甲酸；

所述六种抗球虫药物为氯羟吡啶、二硝托胺、磺胺喹恶啉、盐酸氯苯胍、尼卡巴嗪和地克珠利。