[发明专利]一种草莓白粉病抗性基因及其应用

说明书

本发明涉及一种草莓白粉病抗性基因及其应用，属于分子生物学中的基因工程领域。本发明的发明人从森林草莓中克隆了FvMYB46基因，并通过稳定转基因技术证明降低FvMYB46基因表达能够提高草莓对白粉病的抗性，表明FvMYB46负调控草莓白粉病抗性，同时发现FvMYB46是通过负调控PALs基因的表达来增强草莓对白粉病的抗病性。

技术领域

本发明属于分子生物学和生物技术领域，具体涉及一种草莓白粉病抗性基因及其应用。

背景技术

草莓白粉病是由羽衣草单囊壳侵染所引起的，菌丝主要分布于叶片两面、叶柄、花、花梗和果实。草莓白粉病具有侵染草莓植株所用时间短，与植株建立寄生关系所需时间短，侵染植株的频率高等特点。草莓白粉病发生过程中主要影响因素有：草莓植株的生长状态和生长环境。植株生长状态不同，白粉病菌侵染效果也不同，研究表明在新叶上的侵染效率要远高于老叶。一般情况下，当环境中相对湿度达80％以上，温度在15～25℃时，草莓植株极易感染白粉病。

MYB转录因子是植物中数量最多的一类转录因子之一，含有由51-52个氨基酸为一个重复组成的高度保守的DNA结合域，大多数的MYB蛋白在N端含有一个MYB结构域，由一段氨基酸残基组成。根据其结构域数量，将MYB家族分为四大类，包括1R-MYB、 R2R3-MYB、3R-MYB和4R-MYB蛋白。

MYB转录因子在植物的生长发育和调控中起到重要作用，它们组成了转录因子的一个大家族，其功能研究在模式植物拟南芥中进展较快，而草莓中MYB转录因子家族的功能只有部分得到解析。目前研究表明，MYB46主要在调节木质素合成中起作用，仅在拟南芥和小麦中发现参与调节病害(Vicente et al.,2011；Zheng et al.,2019)，但草莓MYB46编码区序列与拟南芥AtMYB16的相识度为45.81％，与小麦TuMYB46相识度为43.96％；草莓MYB46氨基酸序列与拟南芥AtMYB16的相识度为41.03％，与小麦TuMYB46相识度为40.78％(实施例1)。因此，与拟南芥、小麦MYB46的编码区和氨基酸序列相比，草莓MYB46与拟南芥、小麦MYB46的相识度很低，很难基于拟南芥和小麦MYB46的功能对草莓的功能进行预测和分析。因此，草莓MYB46是否参与白粉病等病害的调控？草莓中MYB46调节病害机理与上述作物是否相同仍不清楚，因此需要将草莓MYB46在草莓中进行功能分析，才能对其功能进行准确判断。

大量的研究表明，培育和种植抗病品种是防治草莓白粉病最经济、有效和安全可靠的途径，而品种的抗病性鉴定、抗源的筛选和抗病新基因挖掘是提高草莓抗病性研究的基础。传统杂交育种耗时长、工作量大，物理、化学、生物等诱变手段很难做到精确定点突变。因此挖掘草莓抗白粉病基因，分析其抗病机理，对于培养抗白粉病草莓新品种具有重要意义。

发明内容

本发明提供一种草莓白粉病抗性基因及其应用，所述的一种草莓白粉病抗性基因FvMYB46编码氨基酸序列如序列1所示，所述FvMYB46基因编码区核苷酸序列如序列2所示。

本发明提供利用RNAi沉默FvMYB46基因增强了草莓对白粉病菌的抗性。

本发明涉及FvMYB46基因通过负调控PALs基因的表达来增强草莓对白粉病菌的抗病性。

本发明的技术问题可通过如下技术方案解决：

(1)草莓FvMYB46基因的克隆，并选取其中335bp片段进行干扰载体构建。

提取草莓叶片中的总RNA，然后将RNA反转录成cDNA；