[发明专利]一种用于诊断乳腺癌的鸡尾酒免疫组化试剂盒

权利要求书

1.一种用于诊断乳腺癌的鸡尾酒免疫组化试剂盒，其特征在于，包括过氧化物酶封闭剂、组合一抗、组合二抗、DAB显色底物、DAB显色缓冲液、快红显色剂、快红显色活化剂、快红缓冲液以及苏木素复染液，其中，所述组合一抗包括鼠抗人细胞角蛋白7单克隆抗体、鼠抗人P63单克隆抗体和兔抗人MHC单克隆抗体；所述组合二抗包括HRP标记的抗鼠二抗聚合物和AP标记的抗兔二抗聚合物；所述乳腺癌为浸润性乳腺癌。

2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述组合一抗中鼠抗人细胞角蛋白7单克隆抗体克隆号为EP16，鼠抗人P63单克隆抗体克隆号为MyR1-P63，兔抗人MHC单克隆抗体克隆号为SMMS-1。

3.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，所述组合一抗中鼠抗人细胞角蛋白7单克隆抗体效价为1:50-1:400，鼠抗人P63单克隆抗体效价为1:50-1:300，兔抗人MHC单克隆抗体效价为1:50-1:350。

4.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述组合一抗还包括三羟甲基氨基甲烷、牛血清蛋白、氯化钠、果绿色素以及Proclin950。

5.根据权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，所述组合一抗还包括6g/L的三羟甲基氨基甲烷、10g/L的牛血清蛋白、8g/L的氯化钠、0 .2g/L的果绿色素以及质量浓度为0 .15％的Proclin950。

6.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述组合二抗中HRP标记的抗鼠二抗聚合物的浓度为8-15μg/mL，AP标记的抗兔二抗聚合物的浓度为6-12μg/mL。

7.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述组合二抗还包括三羟甲基氨基甲烷、氯化钠、牛血清蛋白、吐温20、Proclin950。

8.根据权利要求7所述的试剂盒，其特征在于，所述组合二抗还包括6g/L的三羟甲基氨基甲烷、8g/L的氯化钠、5g/L的牛血清蛋白、质量浓度为0 .1％的吐温20、质量浓度为0.1％的Proclin950。

9.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，其适用于全自动免疫组化染色机。

10.根据权利要求9所述的试剂盒，其特征在于，所述全自动免疫组化染色机的染色程序包括如下步骤：

1)石蜡组织切片脱蜡水化；

2)抗原修复：采用抗原修复缓冲液对切片进行高压修复，温度为100℃，修复20分钟，加样量100微升；

3)滴加3％～3 .5％的过氧化物酶封闭剂进行内源性过氧化物酶的封闭，常温孵育5分钟，加样量为100微升；

4)组合一抗的孵育：37℃孵育30-60分钟，加样量为100微升；

5)组合二抗的孵育：37℃孵育25-30分钟，加样量为100微升；

6)快红显色液的孵育：常温孵育8分钟，加样量为100微升；快红显色剂的配置：快红显色剂、快红显色活化剂和快红缓冲液按照1：1：30的比例配置所得；

7)DAB显色液的孵育：常温孵育5分钟，加样量为100微升；DAB显色液的配置：DAB显色底物和DAB显色缓冲液1：20比例配制所得；

8)衬染：苏木素常温孵育1 .5分钟，加样量为100微升；

9)水性封片胶封片。