[发明专利]基于比率荧光和比色双模式的纳米探针及其制备方法和在检测桑色素中的应用

权利要求书

1.一种基于比率荧光和比色双模式的纳米探针，其特征在于：所述纳米探针为钆掺杂碳量子点Gd-CDs；以3-氨基苯硫酚为碳源，六水合硝酸钆为钆掺杂剂，一步水热法制备钆掺杂碳量子点，除溶剂得到棕色粘稠物，将该粘稠物溶于超纯水中，离心去除不溶物，冷冻干燥得到钆掺杂碳量子点Gd-CDs固体粉末；具体制备方法如下：

（1）0.03 g 3-氨基苯硫酚和0.1 g六水合硝酸钆混合，加入10 mL无水乙醇，超声10min使反应前体完全溶解，得到混合液；

（2）混合液转入聚四氟乙烯高压反应釜并置于烘箱中，180 ℃下反应12 h反应前体完全碳化，得到棕绿色溶液；

（3）步骤（2）所得棕绿色溶液8000 r/min离心10 min，旋蒸去除上清液中的乙醇，再加入10 mL超纯水，超声5 min充分溶解，混合溶液在8000 r/min离心10 min，收集红棕色上清液；

（4）步骤（3）所得红棕色上清液利用100-500 Da透析袋透析处理6 h，每隔2 h换一次超纯水，透析完成后，所得溶液冷冻干燥获得Gd-CDs固体粉末。

2.利用权利要求1所述的基于比率荧光和比色双模式的纳米探针在检测桑色素中的应用，其特征在于：所述纳米探针利用比率荧光法检测桑色素，具体应用方法为：

（1）Gd-CDs储备液的制备：0.1g Gd-CDs固体粉末溶于10 mL超纯水，配制成浓度为10mg/mL的Gd-CDs储备液，在激发波长为364 nm时，Gd-CDs在415 nm和490 nm处表现出双荧光发射峰；

（2）桑色素储备液的制备：0.03 g桑色素粉末溶于10 mL无水乙醇，超声10 min充分溶解，得到浓度为0.01 M的桑色素储备液；

（3）桑色素含量与Gd-CDs荧光强度之间线性关系的获得：Gd-CDs储备液在比色皿中稀释至0.24 mg/mL，向该溶液加入终浓度为0-150 μM的桑色素溶液，在364 nm激发下，记录Gd-CDs与桑色素混合溶液在490 nm和415 nm下的荧光强度比值I₄₉₀/I₄₁₅；通过Origin软件线性拟合桑色素浓度c_morin与I₄₉₀/I₄₁₅，得到线性方程：I₄₉₀/I₄₁₅ =0.3665×c_morin + 1.5031,R² = 0.998；式中I₄₉₀和I₄₁₅为加入桑色素过程中Gd-CDs与桑色素混合溶液在490 nm和415nm处的荧光强度；可检测的线性范围为0.04-95 µM，最低检出限为25 nM。

3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于：所述纳米探针利用比率荧光法检测实际待测样品中桑色素加标回收率，具体方法为：

待测样品经0.22 μm微孔膜过滤去除颗粒悬浮液，稀释一倍后存放于4 ℃冰箱，备用；

向稀释后的待测样品中加入Gd-CDs储备液，Gd-CDs的终浓度为0.24 mg/mL，测得初始空白浓度，分别加入0.01 M桑色素储备液2.05、4.1、8.2、12.3 μL，此时混合溶液中桑色素的浓度分别为10、20、40、60 μM，分别测定该混合溶液在415 nm和490 nm处的荧光强度，并分别计算其比值I₄₉₀/I₄₁₅；将I₄₉₀/I₄₁₅代入线性方程I₄₉₀/I₄₁₅ = 0.3665×c_morin + 1.5031，计算得到所对应桑色素的检出浓度。