[发明专利]一种血人参提取物在制备美白祛斑制剂方面的应用

说明书

本发明公开了一种血人参提取物在制备美白祛斑制剂方面的应用。本发明包括：一种血人参提取物在制备美白祛斑制剂方面的应用，作为抑制剂抑制酪氨酸酶活性、抑制黑色素瘤细胞的增殖的应用、抑制黑色素合成的应用，以及血人参提取物从血人参中分离纯化方法。本发明提出的血人参提取物分离提纯的方法，能够将血人参总黄酮的纯度提高至46％以上。本发明提出的血人参提取物能够作为抑制剂抑制酪氨酸酶活性、抑制黑色素瘤细胞的增殖、抑制黑色素瘤细胞内酪氨酸酶活性和黑色素合成的应用，具有很好的美白祛斑的作用。

技术领域

本发明涉及应用血人参技术领域，特别是一种血人参提取物在制备美白祛斑制剂方面的应用。

背景技术

血人参，中药名。为豆科木蓝属植物茸毛木蓝(Indigofera stachyoides Lindl.)的干燥根。具有清热解表，化痰，利湿，活血止痛之功效。

血人参的黄酮类成分主要有表儿茶素、儿茶素、原儿茶醛、原儿茶酸、没食子酸等成分。在血人参的总黄酮提取工艺研究中发现其总黄酮在生药中的含量较低，其纯度只有4.33％，不利于活性成分的药效发挥。且目前对于血人参的应用，仅停留在传统功效上，未见对其开发出其他应用。

发明内容

本发明的目的在于，提供一种血人参提取物在制备美白祛斑制剂方面的应用。本发明提出的血人参提取物分离提纯的方法，能够将血人参提取物中总黄酮的纯度提高至46％以上。本发明提出了血人参提取物能够作为抑制剂抑制酪氨酸酶活性、抑制黑色素瘤细胞的增殖、抑制黑色素瘤细胞内酪氨酸酶活性和黑色素合成的应用，应用效果通过试验验证，所以血人参提取物能够很好的美白祛斑的作用。

本发明的技术方案：

一种血人参提取物在制备美白祛斑制剂方面的应用。

一种血人参提取物作为抑制剂抑制酪氨酸酶活性的应用。

一种血人参提取物作为抑制剂抑制黑色素瘤细胞的增殖的应用。

一种血人参提取物作为抑制剂抑制黑色素瘤细胞内酪氨酸酶活性和黑色素合成的应用。

前述的应用中，所述的血人参提取物从血人参中分离纯化得到。

前述的应用中，所述的血人参提取物从血人参中分离纯化的过程包括如下步骤：

(1)取血人参粉，用50-70％乙醇提取3次，每次1.5-2.5h，提取液过滤，将过滤液于旋转蒸发仪中40-50℃减压回收乙醇至无醇味，得到浓缩液；

(2)将步骤(1)得到的浓缩液加0.8-1.5倍水稀释后，取0.8-1.2倍体积的石油醚萃取1-2次，弃去石油醚层，水层继续加0.8-1.2倍体积的乙酸乙酯萃取5-7次，弃去水层，将乙酸乙酯萃取液减压浓缩回收乙酸乙酯，于真空干燥箱中干燥，得到乙酸乙酯部位提取物；

(3)大孔吸附树脂的预处理：取AB-8型大孔吸附树脂，加2BV95％乙醇浸泡22-26h使其充分溶胀，过滤后反复用蒸馏水清洗至无白色浑浊、无乙醇味，然后分别用2-5％盐酸溶液和2-5％NaOH溶液浸泡2.5-3.5h，用蒸馏水反复冲洗至中性，最后用蒸馏水保鲜，密封储存，得到预处理的AB-8型大孔吸附树脂；

(4)上样液溶液的制备：取步骤(2)得到的乙酸乙酯部位提取物，加蒸馏水超声溶解，配制得到浓度为5-5.5mg/mL的血人参提取物溶液；

(5)纯化：取8-12g步骤(3)得到的预处理的AB-8型大孔吸附树脂，湿法装柱，缓慢装入层析柱中，取调pH值为3.5-4.5的步骤(4)得到的血人参提取物溶液65-75mL4.7BV，以0.8-1.2mL/min的体积流量上样，待吸附2.5-3.5h后，纯水除杂，用110-130mL8BV的65-75％乙醇以2.5-3.5mL/min的体积流量进行洗脱，收集洗脱液浓度干燥，得分离纯化的成品。