[发明专利]一种酶标抗体保护液

说明书

本发明涉及酶联免疫检测试剂技术领域，公开了一种酶标抗体保护液，包括以下成分：唾液酸糖蛋白(来源于燕窝)、明胶(来源于牛)、Procline 200、Triton X－100、聚乙烯吡咯烷酮，并用0.1M的磷酸缓冲液调节pH＝7.4。本发明的酶标抗体保护液，采用来源于燕窝的唾液酸糖蛋白作为保护蛋白，唾液酸糖蛋白是一种保水性良好的蛋白，对抗体和酶均由良好的保护作用，并且该蛋白来自于金丝雀唾液，不含有免疫球蛋白，以解决现有的酶标抗体保护溶液因自身含有免疫球蛋白导致的无法适用于含有免疫球蛋白的酶联免疫分析或以免疫球蛋白为检测对象的酶联免疫分析。

技术领域

本发明涉及酶联免疫检测试剂技术领域，特别是涉及一种酶标抗体保护液。

背景技术

在酶联免疫检测试剂盒生产中，需要使用保护溶液对抗体和酶标抗体进行保护，以使商品化试剂盒拥有更长的货架期。目前的保护溶液对酶标抗体的保护期一般为1年，无法适应长时间保存的要求。并且因为其中含有由蛋白成分带入的免疫球蛋白，如传统的酶标抗体保护液含有牛血清白蛋白，卵白蛋白，乳蛋白等蛋白，不可避免的代入IgG，IgY等免疫球蛋白，给一些对免疫球蛋白林敏的免疫检测实验带来背景值，导致酶联免疫检测试剂盒无法适用于一些特殊的酶联免疫分析，如以免疫球蛋白为检测对象的免疫分析，或者背景干扰要求较高的免疫分析。此外，传统的酶标抗体保护液还含有蔗糖、果糖、海藻糖等小分子糖类，对免疫检测带来一定的干扰。

发明内容

本发明要解决的技术问题是：现有的保护溶液无法长时间保存，以及无法适用于含有免疫球蛋白的酶联免疫分析或者以免疫球蛋白为监测对象的酶联免疫分析。

为了解决上述技术问题，本发明提供了一种酶标抗体保护液，包括以下成分：唾液酸糖蛋白(来源于燕窝)、明胶(来源于牛)、Procline 200、Triton X－100、聚乙烯吡咯烷酮，并用0.1M的磷酸缓冲液调节pH＝7.4。Procline 200在本发明的方案中作为防腐剂，与其他组分共同作用以延长酶标抗体保护液的保护时间。Triton X－100用于增加唾液酸糖蛋白的溶解性。

优选的，唾液酸糖蛋白采用以下步骤制备：10g干燕窝，使用7M尿素浸提20～24小时，离心取上清液，然后使用40Kda截流量透析膜进行透析除去尿素，最后将透析后的产物冻干即得到唾液酸糖蛋白。

优选的，唾液酸糖蛋白的浓度为0.5～3mg/mL，明胶的浓度为1～4mg/mL，Procline200的浓度为2.5～6mg/mL，Triton X－100的浓度为2.5～6mg/mL，聚乙烯吡咯烷酮的浓度为3～6mg/mL。

优选的，唾液酸糖蛋白的浓度为1mg/mL，明胶浓度为2mg/mL，Procline 200浓度为5mg/mL，Triton X－100的浓度为5mg/mL，聚乙烯吡咯烷酮的浓度为5mg/mL。

优选的，磷酸缓冲液包括以下含量的组分：0.1mol/L的磷酸氢二钠(Na₂HPO₄)、0.1mol/L的磷酸二氢钠(NaH₂PO₄)，其中磷酸氢二钠与磷酸二氢钠的体积比为80～83：17～20，使用0.1M的NaOH或者HCl调节pH至7.4。

与现有技术相比，本发明具有以下优点：

1、本发明的酶标抗体保护液，采用来源于燕窝的唾液酸糖蛋白作为保护蛋白，唾液酸糖蛋白是一种保水性良好的蛋白，对抗体和酶均有良好的保护作用，并且该蛋白来自于金丝雀唾液，不含有免疫球蛋白，以解决现有的酶标抗体保护溶液因自身含有免疫球蛋白导致的无法适用于含有免疫球蛋白的酶联免疫分析或以免疫球蛋白为检测对象的酶联免疫分析；

2、本发明的酶标抗体保护液，采用高糖基化(糖蛋白中糖的比例约为40％)的唾液酸糖蛋白作为酶标抗体保护蛋白，其中的糖类与蛋白以结合态的形式存在于保护液中，不会对酶联免疫检测造成干扰；