[发明专利]一种荧光探针、增强型比率荧光传感器、方法及应用

权利要求书

1.一种增强型比率荧光传感器的制备方法，其特征在于，所述的增强型比率荧光传感器包括荧光探针，所述的荧光探针在波长604 nm处有红色荧光的发射峰，所述荧光探针对四环素类抗生素在波长512 nm处产生绿色荧光的发射峰，所述荧光探针的粒径为73~83nm；

该制备方法包括以下步骤：

步骤1：将溶有硝酸锌的甲醇溶液和溶有2-甲基咪唑的甲醇溶液进行混合搅拌反应，得到沸石咪唑酯骨架ZIF-8沉淀；步骤1中，所述溶有硝酸锌的甲醇溶液中的锌离子与2-甲基咪唑的摩尔比为1:（69~72）；

步骤2：将三联吡啶氯化钌六水合物溶于水中，并采用氢氧化钠调节所得溶液的pH；步骤2中，将三联吡啶氯化钌六水合物溶于水中所得溶液的浓度为（3~6）mg/mL，溶液初始pH为8~8.3，采用氢氧化钠调节后溶液的pH为12；

步骤3：将步骤1得到的沸石咪唑酯骨架ZIF-8沉淀，分散于步骤2的溶液中，搅拌反应，经过离心、水洗、干燥得到沉淀为所述荧光探针，将所述荧光探针加入水中得到增强型比率荧光传感器，沸石咪唑酯骨架ZIF-8与三联吡啶氯化钌六水合物的质量比为17:（12~24）。

2.一种增强型比率荧光传感器检测四环素类抗生素的方法，其特征在于，所述的增强型比率荧光传感器为权利要求1所述的增强型比率荧光传感器的制备方法制得的增强型比率荧光传感器，所述检测四环素类抗生素的方法包括如下步骤：

步骤1：配制四环素类抗生素标准溶液；

步骤2：取不同体积步骤1所配制的四环素类抗生素标准溶液，分别加入到增强型比率荧光传感器溶液中得到不同的混合溶液，所述混合溶液的pH为8.6~8.7；所述的四环素类标准溶液的浓度范围为0～50 μM；所述增强型比率荧光传感器溶液的浓度为（3.7×10^-2~3.8×10^-2）g/L；

步骤3：利用荧光分光光度计测定所述的不同的混合溶液的荧光光谱，利用荧光分光光度计测定荧光光谱时的激发波长为395 nm，待测样品溶液的pH为3.24~10.46，反应时间为3分钟，反应温度为50~70℃；记录在512 nm和604 nm发射波长下的荧光强度F₅₁₂和荧光强度F₆₀₄，以荧光强度F₅₁₂与荧光强度F₆₀₄的比值F₅₁₂/F₆₀₄为纵坐标，以四环素类抗生素浓度为横坐标，绘制标准曲线；

步骤4：向待测样品溶液中加入所述的增强型比率荧光传感器反应，后测定荧光强度F₅₁₂和荧光强度F₆₀₄，并计算F₅₁₂/F₆₀₄比值，通过标准工作曲线计算待测样品中四环素类抗生素的含量。

3.如权利要求2所述的增强型比率荧光传感器检测四环素类抗生素的方法，其特征在于，所述的荧光探针Ru@ZIF-8在波长604 nm处有红色荧光的发射峰，对四环素类抗生素在波长512 nm处产生绿色荧光的发射峰。

4.如权利要求2或3任一权利要求所述的增强型比率荧光传感器检测四环素类抗生素的方法用于检测饮用水、牛奶和牛肉中的四环素类抗生素的应用，对四环素类抗生素的检测线性范围为0～50 μM；

所述四环素类抗生素选自四环素、金霉素、土霉素和强力霉素，对所述四环素、金霉素、土霉素和强力霉素的最低检测限分别为2.4 nM，4.2 nM，1.6 nM和7.2 nM，所述饮用水、牛奶和牛肉的加标回收率为88.9%～112.14%。