[发明专利]一种具有广谱裂解活性的抗菌肽P104、裂解酶LysP53及其应用有效
| 申请号： | 202110760643.6 | 申请日： | 2021-07-05 |
| 公开（公告）号： | CN113549610B | 公开（公告）日： | 2022-11-11 |
| 发明（设计）人： | 危宏平;杨航;李唱唱;余军平;蒋梦薇 | 申请（专利权）人： | 中国科学院武汉病毒研究所 |
| 主分类号： | C12N9/88 | 分类号： | C12N9/88;C12N15/60;C12N15/70;C12N1/21;A61K38/51;A61P31/04;C12R1/19 |
| 代理公司： | 武汉天领众智专利代理事务所(普通合伙) 42300 | 代理人： | 杨建军 |
| 地址： | 430000 湖北省武*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 具有 广谱 裂解 活性 抗菌 p104 lysp53 及其 应用 | ||
1.一种具有广谱裂解活性的抗菌肽P104，其特征在于，所述抗菌肽P104的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。
2.如权利要求1所述的具有广谱裂解活性的抗菌肽P104，其特征在于，所述抗菌肽P104的基因序列如SEQ ID NO.3所示。
3.一种具有广谱裂解活性的裂解酶LysP53，其特征在于，所述裂解酶LysP53包含权利要求1所述的抗菌肽P104，所述裂解酶LysP53的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。
4.如权利要求3所述的具有广谱裂解活性的裂解酶LysP53，其特征在于，所述裂解酶LysP53的基因序列如SEQ ID NO.4所示。
5.如权利要求3或4所述的具有广谱裂解活性的裂解酶LysP53，其特征在于，扩增所述裂解酶LysP53核苷酸序列的引物序列如SEQ ID NO.5和SEQ ID NO.6所示。
6.含有权利要求4所述裂解酶LysP53基因的重组表达载体，其特征在于，所述重组表达载体为原核表达载体pET28a-LysP53。
7.含有权利要求6所述重组表达载体的宿主细胞，其特征在于，所述宿主细胞为大肠杆菌BL21(DE3)。
8.如权利要求3或4所述的具有广谱裂解活性的裂解酶LysP53，其特征在于，所述裂解酶LysP53的制备方法包括如下步骤：
S1、从噬菌体P53基因组中扩增裂解酶LysP53基因；
S2、构建表达所述裂解酶LysP53基因的重组表达载体pET28a-LysP53；
S3、将所述重组表达载体pET28a-LysP53转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞，筛选得到表达所述裂解酶LysP53基因的工程菌；
S4、使用IPTG进行诱导表达，获得重组基因表达产物；
S5、将重组基因表达产物，经镍柱纯化分离，得到所述裂解酶LysP53。
9.权利要求1所述的具有广谱裂解活性的抗菌肽P104和/或权利要求3所述的具有广谱裂解活性的裂解酶LysP53在裂解革兰氏阴性菌中的应用。
10.如权利要求9所述的应用，其特征在于，所述革兰氏阴性菌包括以下几种：鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯菌和大肠杆菌。
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