[发明专利]一种杀鲑气单胞菌和大菱鲆弧菌的二联疫苗及应用

说明书

本发明公开一种杀鲑气单胞菌和大菱鲆弧菌的二联疫苗及应用，涉及微生物疫苗制备领域；本发明公开的二联疫苗的抗原为灭活的杀鲑气单胞菌和大菱鲆弧菌；所述杀鲑气单胞菌的保藏编号为CCTCC M 2021397；所述大菱鲆弧菌的保藏编号为CCTCC M 2021399。本发明制备的杀鲑气单胞菌和大菱鲆弧菌二联灭活疫苗的制备工艺简单、产量稳定、成本低，为可大量获得具有较高免疫效果且安全性高的灭活疫苗，弥补了目前的杀鲑气单胞菌和大菱鲆弧菌二联灭活疫苗产品的空白。本发明制备的杀鲑气单胞菌和大菱鲆弧菌二联灭活疫苗可以有效的遏制杀鲑气单胞菌和大菱鲆弧菌病的发生和流行，为本领域大菱鲆的安全高效养殖提供了保障。

技术领域

本发明涉及微生物疫苗制备领域，特别是涉及一种杀鲑气单胞菌和大菱鲆弧菌的二联疫苗及应用。

背景技术

大菱鲆(Scophthalmus maximus L)俗称“多宝鱼”，在大西洋沿岸、北海、黑海、地中海一带生活，15℃-18℃为其最佳生长温度范围，但在0℃-30℃时也可生存，在盐度为28-32％的水中可正常生活，pH耐受范围7.6-8.2。消费者对于大菱鲆的喜爱使得大菱鲆经济价值越来越高，我国进行了大菱鲆大规模的商业养殖，约占世界养殖总量的十分之九。但是，随着大菱鲆养殖规模的逐渐扩大，大菱鲆疾病的暴发也越来越频繁。

杀鲑气单胞菌属气单胞菌科、气单胞菌属，是一种遍布自然界的兼性厌氧的革兰氏阴性不动菌，是气单胞菌属中最早被鉴定的致病菌。在其五个亚种中，患病鱼类中最常发现的亚种是杀鲑亚种(Aeromonas salmonicida subsp.salmonicida)，同时也被称为典型的杀鲑气单胞菌亚种。非典型杀鲑气单胞菌为其他四个亚种，分别是溶果胶亚种(Aeromonas salmonicida subsp.pectinolytica)、杀日本鲑亚种(Aeromonassalmonicida subsp.masoucida)、无色亚种(Aeromonas salmonicidasubsp.achromogenes)以及史氏亚种(Aeromonas salmonicida subsp.smithia)。除了溶果胶亚种不是鱼类病原体以外，其余的三种病原体的感染都可导致非典型疥疮的症状。除虹鳟、大西洋鲑等鲑鳟科鱼类外，越来越广泛的水产养殖鱼类中发现了非典型的杀鲑气单胞菌菌株感染，例如黑岩鱼(Sebastes schlegeli)、鲫鱼(Carassius Carassius)、鲤鱼(Cyprinus carpio)、团鱼(Cyclopterus lumpus)和欧洲鲈鱼(Perca fluviatilis)，同时其无色亚种、溶果胶亚种等还会使大菱鲆、半滑舌鳎等鱼感染。2005年，Bjrnsdottir等人报道了杀鲑气单胞菌引起大菱鲆肝脏出血，体表溃疡等病理性变化；2007年山东省某养殖场的体长为5厘米的大菱鲆幼苗因感染非典型杀鲑气单胞菌发生病害死亡；同时，根据张正等人文献记载，半滑舌塌养成期的常见疾病之一为杀鲑气单胞菌所引起的皮肤溃疡病，在病发初期，可观察到病鱼背部有部分白色圆斑，随着病情推进，白斑区域逐渐充血发红，至后期产生皮肤疥疮，病鱼开始死亡。无论是杀鲑气单胞菌典型性菌株还是杀鲑气单胞菌非典型菌株，它们都是水产养殖业发生经济损失的元凶。

大菱鲆弧菌(Vibrio scophthalmi)是革兰氏阴性菌和氧化酶阳性的兼性厌氧短杆菌，最早在西班牙发现并分离鉴定将其归类为弧菌属，弧菌属的一些细菌对人类和海洋动物具有致病性，且如果宿主处于应激条件下，致病性尤其严重。在大菱鲆患病后，病鱼进食减少或停止进食，腹部有积水，对病鱼进行解剖发现其肝脾肠充血发红，有白色条状物质在消化道中，大菱鲆弧菌常被认为是引起腹水病的病原菌之一。