[发明专利]具有抗氧化活性的微拟球藻多糖的制备方法

权利要求书

1.一种具有抗氧化活性的微拟球藻多糖的制备方法，其特征在于：包括如下步骤：

（1）将微拟球藻粉溶于水，置于超声波-微波条件下处理，得提取液；

（2）向所得提取液中投入复合酶进行酶解，所述复合酶为纤维素酶与果胶酶；

（3）酶解后灭酶处理，冷却后酶解液置于离心机中离心，得上清液；

（4）将上清液减压蒸馏，加入无水乙醇醇沉；

（5）醇沉混合液离心，将离心沉淀物冷冻至共晶点，真空冷冻干燥，得微拟球藻粉多糖粗提物；

（6）将多糖粗提物溶解并加入脱色剂，置于摇床内震荡脱色，脱色后离心得处理液；

（7）向处理液中加入Sevage试剂混匀除去蛋白质，离心后得上清液真空冷冻干燥处理，得到微拟球藻多糖纯化物；

（8）配制微拟球藻多糖纯化物溶液，加入α-淀粉酶对微拟球藻多糖进行修饰处理，高温灭酶后得酶修饰微拟球藻多糖；

步骤（1）中配制微拟球藻溶液的料液比为1：10g/ml，超声波的功率为300W-400W，微波的功率为100-200W，超声波-微波的处理时间为15-25min；

步骤（2）中纤维素酶与果胶酶的质量比为1：1，提取液中复合酶的用量为0.2%-0.4%，酶解的温度为40-60℃；

步骤（3）中灭酶处理为高温灭酶，灭酶温度为80℃，灭酶时间为30min；

步骤（4）中无水乙醇的用量为减压蒸馏后溶液体积的3倍；

步骤（5）中共晶点温度为＜-70℃；

步骤（3）、（5）、（6）、（7）中所述离心机均为高速冷冻离心机，离心时离心转速为5000r/min，温度为4℃，时间15min；

步骤（6）中脱色剂为活性炭，活性炭的用量为0.03-0.1g/mL，脱色工艺为：微拟球藻粗多糖溶液浓度为0.5-1.5mg/mL，摇床转速为100-200 r/min，脱色温度为40-50℃，脱色时间为0.5-1.5h；

步骤（7）中Sevage试剂中氯仿:正丁醇=3:1 V/V，Sevage试剂与处理液的用量比为4:1V/V；

步骤（8）中微拟球藻多糖纯化物溶液的浓度为1mg/mL，α-淀粉酶加酶量为200~280U/g，修饰温度为45~55℃，修饰时间为10~20min。